人弥漫大B淋巴瘤细胞验收时的注意事项有哪些?
小杨 / 2022-11-07 09:03:14


弥漫大B细胞淋巴瘤是NHL中最常见的类型,几乎占所有病例的1/3。这类淋巴瘤占以前临床上的“侵袭性”或“中高度恶性”淋巴瘤的大多数病例。弥漫大B细胞淋巴瘤正确的诊断需要血液病理学专家根据合适的活检和B细胞免疫表型的证据而得出。近年多个国际多中心随机对照临床试验研究资料证明,其标准的一线治疗方案应当是利妥昔单抗(Rituximab,R)+CHOP方案,并且通过增加方案的剂量密度,缩短疗程间隙时间,从而获得更好的疗效,如R-CHOP14 方案。

一、产品信息
平台编号:Bio-121742
规格:1×10⁶Cells/T25培养瓶
细胞信息:OCI-Ly3
细胞名称:人弥漫大B淋巴瘤细胞OCI-Ly3
产品规格:T25培养瓶x1,1.5ml冻存管x2
细胞数量:1x10^6;1x10^6
保存温度:37℃;-198℃
运输方式:常温保温运输;干冰运输
安全等级:1
用途限制:仅供科研用途2类
培养体系:DMEM高糖培养基+20%FBS+1%三抗
培养温度:37℃
二氧化碳浓度:5%
简介:人弥漫大B淋巴瘤细胞OCI-Ly3细胞于1983年从52岁男性B细胞非霍奇金淋巴瘤骨髓样本中建立。为常规的药物筛选模型,悬浮培养,易聚团。引种自DSMZ(ACC-761)
用途:细胞系
注意事项:仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用(产品信息以出库为准)
  
二、诊断 
弥漫大B细胞淋巴瘤正确的诊断需要血液病理学专家根据合适的活检和B细胞免疫表型的证据而得出。有突出的纵膈侵犯的病人有时候被诊为一个独立的亚型称原发性纵膈弥漫大B细胞淋巴瘤,该肿瘤发生于前纵隔,可能起源于胸腺,通常有明显的间质纤维间隔,这类病人中位年龄更年青(37岁),女性多发(占66%)。
弥漫大B细胞淋巴瘤可以原发淋巴结或原发结外病变起病。超过50%的病人诊断时有结外病变侵犯。最常见的结外病变是胃肠道和骨髓,各占15~20%的病人。任何器官均可涉及,做诊断性活检是必要的。例如胰腺的弥漫大B细胞淋巴瘤比胰腺癌有好得多的预后,但如果不做活检将错过机会。原发性脑部弥漫大B细胞淋巴瘤近几年发病率增加。

三、治疗 
近年多个国际多中心随机对照临床试验研究资料证明,其标准的一线治疗方案应当是利妥昔单抗(Rituximab,R)+CHOP方案,并且通过增加方案的剂量密度,缩短疗程间隙时间,从而获得更好的疗效,如R-CHOP14 方案。R-EPOCH也可作为一线治疗方案。可供选择的二线治疗方案包括DHAP、ESHAP、GDP、ICE、miniBEAM和MINE等。对于具有明显不良预后因素的初治患者(国际预后指数IPI中高危及高危组),诱导化疗达CR后实施大剂量化放疗联合自体外周血干细胞移植可以明显提高其长期无病生存率和总生存率。对于复发的患者,移植解救比常规化疗解救治疗会取得更好的疗效。

四、预后 
基因表达谱研究结果:美国Stanford大学与美国癌症研究所合作通过基因芯片技术采用超过1000种基因的基因表达谱分析表明DLBCL包含三种不同的分子亚型:生发中心B细胞样(GCB-like)型,表达正常生发中心B细胞特征的基因,预后较好;活化B细胞样(ABC-like)型,表达活化的外周血B细胞和浆细胞特征的基因,预后较差;第三型表达谱,其他无明确特征的异源性类型,但预后同ABC。病理学家们在进一步确定临床病理学类型之后,研究通过免疫组化方法,采用少数几种具有分化谱系代表的标志,将DLBCL分为GCB-like和NON-GCB型,后者包括基因表达谱分类的ABC和第三型,这些标记包括:CD10和bcl-6作为GCB标记,而MUM1作为NON-GCB标记。Rosenwald等报道GCB型5年总生存率76%,NON-GCB型5年总生存率34%。 
 
五、验收细胞注意事项
1、收到人弥漫大B淋巴瘤细胞OCI-Ly3细胞,请查看瓶子是否有破裂,培养基是否漏出,是否浑浊,如有请尽快联系。
2、收到人弥漫大B淋巴瘤细胞OCI-Ly3细胞,如包装完好,请在显微镜下观察细胞。,由于运输过程中的问题,细胞培养瓶中的贴壁细胞有可能从瓶壁中脱落下来,显微镜下观察会出现细胞悬浮的情况,出现此状态时,请不要打开细胞培养瓶,应立即将培养瓶置于细胞培养箱里静止3-5小时左右,让细胞先稳定下,再于显微镜下观察,此时多数细胞会重新贴附于瓶壁。如细胞仍不能贴壁,请用台盼蓝染色法鉴定细胞活力,如台盼蓝染色证实细胞活力正常请按悬浮细胞的方法处理。
3、收到人弥漫大B淋巴瘤细胞OCI-Ly3细胞后,请镜下观察细胞,用恰当方式处理细胞。若悬浮的细胞较多,请离心收集细胞,接种到一个新的培养瓶中。弃掉原液,使用新鲜配制的培养基,使用进口胎牛血清。刚接到细胞,若细胞不多时血清浓度可以加到15%去培养。若细胞迏到80%左右,血清浓度还是在10%。
4、收到人弥漫大B淋巴瘤细胞OCI-Ly3细胞时如无异常情况,请在显微镜下观察细胞密度,如为贴壁细胞,未超过80%汇合度时,将培养瓶中培养基吸出,留下5-10ML培养基继续培养:超过80%汇合度时,请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞,吸出培养液,1000转/分钟离心3分钟,吸出上清,管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。
5、将培养瓶置于37℃培养箱中培养,盖子微微拧松。吸出的培养基可以保存在灭菌过的瓶子里,存放于4℃冰箱,以备不时之需。
6、24小时后,细胞形态已恢复并贴满瓶壁,即可传代。(贴壁细胞)将培养瓶里的培养基倒去,加3-5ml(以能覆盖细胞生长面为准)PBS或Hanks’液洗涤后弃去。加0.5-1ml 0.25%含EDTA的胰酶消化,消化时间以具体细胞为准,一般1-3分钟,不超过5分钟。可以放入37℃培养箱消化。轻轻晃动瓶壁,见细胞脱落下来,加入3-5ml培养基终止消化。用移液管轻轻吹打瓶壁上的细胞,使之完全脱落,然后将溶液吸入离心管内离心,1000rpm/5min。弃上清,视细胞数量决定分瓶数,一般一传二,如细胞量多可一传三,有些细胞不易传得过稀,有些生长较快的细胞则可以多传几瓶,以具体细胞和经验为准。(悬浮细胞)用移液管轻轻吹打瓶壁,直接将溶液吸入离心管离心即可。
7、贴壁细胞,悬浮细胞。严格无菌操作。换液时,换新的细胞培养瓶和换新鲜的培养液,37℃,5%CO2培养。
特别提醒:原瓶中培养基不宜继续使用,请更换新鲜培养基培养。

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