青枯雷尔氏菌致病性分化研究
青枯雷尔氏菌(Ralstonia solanacearum)是植物细菌性青枯病的病原菌,广泛分布于热带,亚热带和温带,它经土壤传播并在维管束中为害寄主.可为害44个科的300多种植物,其中包括许多重要的经济作物,对茄科植物的为害尤为严重,如番茄,辣椒,茄子,烟草,马铃薯等,已成为生产的主要障碍之一.此外,它还可为害花生,香蕉,甘薯,生姜,桉树等.青枯雷尔氏菌表现出高度的种下分化的多态性,包括不同的生理小种,生化型,血清型,基因型,致病型等.从前人的研究可知,青枯雷尔氏菌存在着强致病力菌株和无致病力菌株,前者侵入寄主植物,可导致寄主的发病;后者可以侵染寄主植物,但不引起寄主发病.研究表明,在任何条件下,无致病力菌株无法恢复为强致病力菌株;在特定条件下,强致病力菌株,会散失致病性,弱化形成无致病力菌株;使强致病力菌株产生弱化的原因有营养条件和极端气候引起的病原菌基因突变;在自然条件下,青枯雷尔氏菌的强致病力菌株具有保持致病性相对稳定的机制,抵抗外界条件,侵染寄主植物,引起植物病害.本试验采集了番茄,花生,姜等的青枯病发病植株,采用平板分离法,从中分离并纯化了一批青枯雷尔氏菌菌株,在同一发病植株上既分离到了大量强致病性的青枯菌,也分离到了少量弱致性的青枯菌,表明其在同一发病植株上存在致病力的分化;对病株体内青枯雷尔氏菌分布的研究则表明在不同发病期植
芝麻青枯雷尔氏菌生化特性及致病力分化的研究
将采自江西12个县(市)的芝麻青枯雷尔氏菌29株菌株分别人工接种到寄主植物番茄,茄子,马铃薯和烟草上,鉴定结果表明:全部菌株属于生理小种1;25株菌株属生化变种19,3株属生化变种1V,1株为生化变种Ⅲ一1亚种.对致病力测定结果的聚类分析表明:来自进贤,都昌,南昌,樟树4个红壤旱地传统种植区的菌株致病力最强;来自鄱阳砂壤及潮洲地传统种植区的菌株致病力中等;来自其它6个区域的菌株致病力最弱.因此,江西芝麻青枯雷尔氏菌的致病力存在明显的分化现象,寄主植物,耕作栽培制度和土壤生态是影响青枯雷尔氏菌致病力分化的重要因子.
青枯雷尔氏菌脂肪酸多态性研究
细菌性青枯病是一种由青枯雷尔氏菌(Ralstonia solanacearum)引起的植物毁灭性土传病害.作为最重要的植物病原微生物之一,青枯雷尔氏菌的不同菌株在寄主范围,地理分布,为害特征,流行特征,种下分类等方面存在较大差异,现有的种下分类体系仍不足以描述此差异.本论文对收集整理的40个菌株进行了研究,测定各菌株的生理小种,生化型和致病型;利用气相色谱技术检测菌株细胞内的脂肪酸,分析其脂肪酸的分布多态性;研究青枯雷尔氏菌脂肪酸多态性与现有种下分类方法之间的关系;运用统计分析方法初步建立了脂肪酸型判别模型. 研究结果表明:青枯雷尔氏菌在菌体形态,致病性,生理生化等方面都存在较大的差异,呈现出明显的多态性.青枯雷尔氏菌生理小种1的菌株在致病力上存在着分化,可划分为不同的致病型;生化型与其致病型不存在相关性.在一定范围内,青枯雷尔氏菌生理小种和生化型对于标记菌株特性具有一定的意义,但其分析结果对致病力分化的分析作用,值得进一步探讨. 脂肪酸多态性研究结果表明,来源于同一寄主的枯雷尔氏菌和不同寄主分离的青枯雷尔氏菌,其脂肪酸都存在着明显的多态性;40个青枯雷尔氏菌菌株的脂肪酸分布特征可以聚类成3个类群,即脂肪酸I型,脂肪酸II型和脂肪酸III型;青枯雷尔氏菌生理小种1存在着不同的脂肪酸型,青枯雷尔氏菌脂肪酸多态性与其生化型之间不存在相关性,但是脂肪酸和致病型之间存在一定的相关性:脂肪酸I型为无致病性菌株,脂肪酸II型为过渡性菌株,脂肪酸III型为强致病性菌株. 青枯雷尔氏菌脂肪酸型判别模型的建立:Y1=-16.3353 + 0.0012X1 + 0.0056X9 - 0.0016X16,Y2= -3.4928 + 0.0002X1 + 0.0003X9 + 0.0025X16,Y3= -9.1550 - 0.0003X1 + 0.0039X9 + 0.0042X16,对于一个未知脂肪酸型的青枯雷尔氏菌菌株,首先测定脂肪酸谱图,取出X1(C14:0),X9(C17:0),X16(C18:0),代入方程,计算Yi,当1≦Yi≦2时,归为脂肪酸I型,当2≦Yi≦3时,归为脂肪酸II型,当Yi>3时,归为脂肪酸III型,模型的判别准确率达90.00%以上,达到了实用水平,说明了该建模方法思路合理. 脂肪酸已广泛应用于细菌鉴定中,但是对同一种细菌脂肪酸多态性的分析尚未见报道.青枯雷尔氏菌脂肪酸多态性与致病性之间的相关性有望成为青枯雷尔氏菌小种鉴定的新指标.青枯雷尔氏菌脂肪酸型的研究,为其种下分类建模的标准化和计算机自动分析方法的建立,提供可靠的基础.脂肪酸型判别模型的建立也为其他植物病原菌的致病性研究提供了思路和方法.