食品中阪崎肠杆菌CDC3225-73检验标准
中国微生物菌种查询网 / 2018-09-03 16:47:19
阪崎肠杆菌CDC3225-73ATCC菌种（又称阪崎氏肠杆菌）是肠杆菌科的一种，1980年由黄色阴沟肠杆菌更名为阪崎肠杆菌。阪崎肠杆菌能引起严重的新生儿脑膜炎、小肠结肠炎和菌血症，死亡率高达50% 以上。目前，微生物学家尚不清楚阪崎肠杆菌的污染来源，但许多病例报告表明婴儿配方粉是目前发现的主要感染渠道。
阪崎肠杆菌的检验范围：本标准规定了食品中 阪崎肠杆菌（Enterobacter sakazakii）的检验方法，适用于婴幼儿配方食品、乳和乳制品及其原料中阪崎肠杆菌的检验。
一、设备和材料
除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他设备和材料如下：
1 冰箱：2 ℃～5 ℃。
2 恒温水浴箱：44 ℃±0.5 ℃。
3 恒温培养箱：25 ℃±1 ℃，36 ℃±1 ℃，44 ℃±0.5 ℃
4 天平：感量0.1 g。
5 均质器。
6 振荡器。
7 无菌吸管：1 mL（具0.01 mL 刻度）、10 mL（具0.1 mL 刻度）或微量移液器及吸头。
8 无菌锥形瓶：容量100 mL、200 mL、2000 mL。
9 无菌培养皿：直径90 mm。
10 pH 计或pH 比色管或精密pH 试纸。
11 全自动微生物生化鉴定系统。
二、培养基和试剂
1 缓冲蛋白胨水（buffer peptone water，BPW）
2 改良月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤-万古霉素（modified lauryl sulfate tryptose broth-vancomycin
medium，mLST-Vm）
3 阪崎肠杆菌显色培养基。
4 胰蛋白胨大豆琼脂（trypticase soy agar，TSA）
5 氧化酶试剂
6 L-鸟氨酸脱羧酶培养基：
7 糖类发酵培养基：
8 西蒙氏柠檬酸盐培养基
9 L-赖氨酸脱羧酶培养基：
10 生化鉴定试剂盒。
11 L-精氨酸双水解酶培养基
三、检验程序及操作步骤
1、检验程序见下图：
2、 操作步骤
a. 前增菌和增菌
取检样100 g（mL）加入已预热至44 ℃装有900 mL 缓冲蛋白胨水的锥形瓶中，用手缓缓地摇动至充分溶解，36 ℃±1 ℃培养18 h±2 h。移取1 mL 转种于10 mL mLST-Vm 肉汤，44 ℃±0.5 ℃培养24 h±2h。
b.分离
c. 轻轻混匀mLST-Vm 肉汤培养物，各取增菌培养物1 环，分别划线接种于两个阪崎肠杆菌显色培养基平板，36 ℃±1 ℃培养24 h±2 h。
d. 挑取1 个～5 个可疑菌落，划线接种于TSA 平板。25 ℃±1 ℃培养48 h±4 h。
e.鉴定
自TSA 平板上直接挑取黄色可疑菌落，进行生化鉴定。阪崎肠杆菌的主要生化特征见表1。可选择生化鉴定试剂盒或全自动微生物生化鉴定系统。
Cronobacter sakazakii (Farmer et al.) Iversen et al. 拉丁名
(ATCC? 29004?) 统一编号
Deposited As Enterobacter cloacae (Jordan) Hormaeche and Edwards
Strain Designations 别名 CDC 3225-73 [ATCC 29003, CDC 74-011306]
Application 用途 Characterization
Biosafety Level 生物安全等级 1
Biosafety classification is based on U.S. Public Health Service Guidelines, it is the responsibility of the customer to ensure that their facilities comply with biosafety regulations for their own country.
Product Format 提供形式 freeze-dried
Storage Conditions 保藏条件
Frozen: -80°C or colder
Freeze-Dried: 2°C to 8°C
Live Culture: See Propagation Section
Preceptrol?no
Type Strain 模式菌种 no
Comments 注释 Formerly known as Enterobacter sakazakii
Medium 培养基 ATCC? Medium 3: Nutrient agar or nutrient broth
Growth Conditions 生长条件
Temperature 培养温度: 30°C
Atmosphere 需氧情况: Aerobic
Name of Depositor 寄存者 CDC
References 参考文献 Farmer III JJ, et al. Enterobacter sakazakii: A new species of "Enterobacteriaceae" isolated from clinical specimens. Int. J. Syst. Bacteriol. 30: 569-584, 1980.
Iversen C, et al. Cronobacter gen. nov., a new genus to accommodate the biogroups of Enterobacter sakazakii, and proposal of Cronobacter sakazakii gen. nov., comb. nov., Cronobacter malonaticus sp. nov., Cronobacter turicensis sp. nov., Cronobacter muytjensii sp. nov., Cronobacter dublinensis sp. nov., Cronobacter genomospecies 1, and of three subspecies, Cronobacter dublinensis subsp. dublinensis subsp. nov., Cronobacter dublinensis subsp. lausannensis subsp. nov. and Cronobacter dublinensis subsp. lactaridi subsp. nov. Int. J. Syst. Evol. Microbiol. 58(Pt 6): 1442-1447, 2008 Jun. PubMed: 18523192
Mullane NR, et al. Development of multiple-locus variable-number tandem-repeat analysis for the molecular subtyping of Enterobacter sakazakii. Appl. Environ. Microbiol. 74(4): 1223-1231, 2008 February. PubMed: 18083860