CATC琼脂(Citrate Azide Tween Carbonate Agar)是肠球菌(粪肠球菌、屎肠球菌等)的选择性分离与计数培养基,核心是靠叠氮钠 + 高柠檬酸盐抑制杂菌、TTC 显色区分目标菌。
一、培养基原理
1、基础营养(支持肠球菌生长)
胰酪蛋白胨、酵母浸粉:提供氮源、维生素、生长因子。
柠檬酸钠:主要碳源;高浓度同时起选择性抑制作用。
磷酸二氢钾、碳酸钠:维持 pH 与渗透压稳定(pH 7.0±0.2)。
吐温 - 80:改善表面活性,利于菌落生长与观察。
琼脂:凝固剂。
2、选择性抑制(排除杂菌)
叠氮钠(0.4 g/L):强烈抑制革兰氏阴性菌(如大肠埃希菌)与多数革兰氏阳性非肠球菌(如葡萄球菌)。
高浓度柠檬酸钠(15 g/L):进一步抑制非肠球菌的生长。
两者协同,让肠球菌优先生长,其他菌被显著抑制。
3、特异性显色(区分肠球菌)
TTC(2,3,5 - 三苯基氯化四氮唑,0.1 g/L):无色指示剂。
肠球菌(尤其是粪肠球菌)具有脱氢酶系统,可将无色 TTC 还原为红色不溶性三苯甲臢,使菌落呈现深红色/砖红色。
非肠球菌即使微弱生长,也不还原 TTC 或仅呈淡粉色/无色。
二、实验现象(35–37℃,有氧培养 18–24 h)
1、肠球菌(目标菌)
生长:良好(+++)。
菌落形态:圆形、凸起、光滑、边缘整齐,直径 1–2 mm。
颜色:深红色/砖红色(核心特征)。
背景:培养基保持淡黄色/无色。
2、革兰氏阴性菌(如大肠埃希菌)
生长:完全抑制/极微弱(- / +)。
菌落:无或极小、无色/淡色,不显色。
3、其他革兰氏阳性菌(如金黄色葡萄球菌)
生长:显著抑制。
菌落:无色/淡粉色,不出现深红色。
4、质控参考(典型结果)
菌株 生长 菌落颜色
粪肠球菌 ATCC 29212 +++ 深红色
大肠埃希菌 ATCC 25922 - 无/无色
金黄色葡萄球菌 ATCC 25923 -/+ 无色/淡粉
三、用途与适用场景
食品、饮用水、饮料中肠球菌的分离、计数与初步鉴定。
卫生学监测:粪便污染指示菌检测。
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