中国微生物菌种查询网 内毒素(Endotoxin)是革兰氏阴性菌的细胞壁外壁层上的特有结构。细菌在生活状态时不释放出来，只有当细菌死亡自溶或粘附在其它细胞时才表现其毒性，内毒素的主要化学成分是脂多糖（LPS）中的类脂A成分。LPS作为革兰氏阴性菌细胞壁外膜的重要组分之一，是菌株血清分型的主要依据。
脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)由多糖O抗原、核心多糖和类脂A(lipid A)组成，位于最外层。多糖O抗原向外，由若干个低聚糖的重复单位组成的多糖链，即革兰氏阴性菌的菌体抗原(O抗原)，有特异性。核心多糖由庚糖、半乳糖、2-酮基-3-脱氧辛酸(2-keto-3-deoxyoctonic acid，KDO)等组成，所有革兰氏阴性细菌都有此结构。类脂A是以脂化的葡萄胺二糖为单位，通过焦磷酸酯键组成的一种独特的糖脂化合物，具有致热作用，是革兰氏阴性细菌内毒素的毒性成分。
这里介绍几种细菌脂多糖的提取方法。
一、热酚水法
实验原理：
热酚水法是提取LPS的经典方法，是基于破坏细菌细胞膜及利用苯酚析出蛋白质。将细菌悬液加入热酸——水混合液中，冷却，离心。混合液可分为水溶液层（内含水溶性脂多糖及核酸等）和酸层（内含蛋白质等），近年来发现在酸层中也含糖类；沉淀中含细胞残体。
实验方法：
1、将细菌浓悬液用盐水经2500转/分，离心20分钟洗涤一次。
2、将沉淀的菌体混匀于蒸馏水中，放66℃水浴，然后滴加等量的90%热酚溶液（预热至66℃），边加边摇，而后在66℃水浴中搅拌25分钟。
3、在水浴中冷却，于4℃冰箱过夜。
4、以2000转/分离心15分钟。
5、将上层水溶液吸到另一试管中。
6、剩下的酚层及残渣组分可再加上述同量水在热水浴中搅拌30分钟，冷却，离心，取上层水溶液。
7、将两次提的水溶液混合，置透析袋中于生理盐水中透析2天，其间换几次盐水，以除去酚。
8、透析后的水溶液层经浓缩（如用聚乙二醇在透析袋外层涂抹以除去水分），即为粗制脂多糖，于冰箱内保存备用。
二、超声波处理法
1、将细菌经2500转/分，离心20分钟洗涤1-2次，将沉淀配成2倍于原始菌液浓度的浓菌液。
2、用超声波发生器中频（约相当于12000 cps）处理20分钟。
3、处理液经3000转/分，离心30分钟，吸取上清液即为脂多糖，置4℃冰箱保存备用。
三、煮沸法
1、将培养后得到的浓菌液沸水浴煮沸2小时。
2、置冰箱静置两星期以上（使菌体残渣自由下沉）。
3、3000转/分离心30分钟，取上清夜即为粗脂多糖抗原，置冰箱中保存备用。