细胞的天敌支原体
中国微生物菌种查询网 / 2018-08-14 14:43:32

       中国微生物菌种查询网支原体对细胞的影响,可以从两方面考虑。一方面是对细胞的直接影响,细胞被支原体污染后,增殖缓慢,部分细胞变圆,从瓶壁上脱落,部分细胞虽然表面变化不十分明显,实际上潜伏着多方面的危险。另一方面,支原体可以通过消耗培养基中的精氨酸,抑制细胞DNA、RNA的合成,降低细胞的抵抗力。因此,支原体污染对细胞的影响是非常广泛和深远的。造成细胞污染的支原体有很多,但主要有四种支原体:口腔支原体、精氨酸支原体、猪鼻支原体和莱氏无胆甾原体。由于支原体体积很小,直径约在0.2-2.0um之间,可以通过滤膜而直接造成培养基或血清的污染。另外,被支原体污染的细胞培养基液体往往并不浑浊,细胞受损程度并不明显,形态很少改变,这样就更增加 了人们对其的防范难度。
由于支原体种类不同,应采取不同的方法进行检测,常用的方法有如下几种:
1、荧光染色法(DNA染色法):此法快捷、简便、价廉,但其灵敏度有一定欠缺,易造成漏检,若细胞片制备不当则结果难以判断。
2、间接免疫荧光法和免疫印迹:简便、快速、特异性强,如果应用单克隆抗体试剂,效果会更好。
3、观察细胞的形态和生长特征:支原体污染比较严重时可出现生长减慢,有的培养基pH明显变酸,并出现细胞病变,其病变特征与病毒感染相似,因此不能准确诊断。
4、PCR法检测支原体:最为快速、灵敏,取样量少,既可进行细胞检测也可进行细胞上清的检测,同时可以检测8种支原体的污染,是目前常用的检测手段。但其成本较高,条件要求严格,有时易出现假阳性。
5、分离培养法:大多数支原体可出现特有的典型菌落。该方法准确、可靠,但时间长。 但其实验周期较长,所以常用于进行对怀疑细胞的最后甄别。
6、电子显微镜和免疫电子显微镜法:此法非常直观、准确,但对使用环境要求高,操作复杂,实验周期较长,敏感性不高,常作为样品的最后定性检测。



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