滤膜法检测生活饮用水的原理与适用范围及标准操作流程！
小杨 / 2026-03-18 09:41:08
百欧博伟生物：滤膜法是生活饮用水微生物检测的首选标准方法，尤其适用于低浊度、低菌量的出厂水与管网水，依据GB/T 5750.12-2023执行。
一、方法原理
用0.45 μm孔径的无菌微孔滤膜过滤定量水样，将水中细菌截留在滤膜上；再将滤膜贴于选择性培养基表面培养，根据典型菌落特征计数，计算每 100 mL 水样中的菌落数（CFU/100mL）。
二、适用范围
适用于生活饮用水、瓶装水、桶装水等低浊度水样
不适用于高浊度、高悬浮物或含大量藻类的水源水
三、核心材料与设备
滤膜：孔径 0.45 μm，直径 47 mm，无菌包装
滤器：无菌过滤装置（可高压灭菌或一次性）
抽滤装置：真空泵或无油空压机
培养基：
培养箱：36℃±1℃（总大肠）、44.5℃±0.5℃（耐热大肠）
四、标准操作步骤（总大肠菌群为例）
1、准备工作
滤膜与滤器灭菌：滤膜沸水浴 15 min；滤器 121℃高压灭菌 20 min 或火焰灭菌。
制备 M-endo 琼脂平板，冷却备用。
2、水样过滤
无菌操作：用无菌镊子取滤膜，粗糙面向上贴于滤器滤床，固定滤器。
量取100 mL水样（污染重时可稀释），注入滤器，在-0.05 MPa负压下抽滤。
抽滤完毕，用5 mL 无菌水冲洗滤器内壁 3 次，确保细菌全部截留于滤膜。
3、培养
无菌镊子取下滤膜，菌面朝上贴于 M-endo 平板，无气泡。
平板倒置，36℃±1℃培养 24 h±2 h。
4、结果判读与计数
典型菌落：紫红色、带金属光泽；深红色（无/略带金属光泽）；淡红色、中心色深。
计数符合特征的菌落数，结果以CFU/100mL报告。
五、关键注意事项
无菌操作：全程严格无菌，防止外源污染。
滤膜贴放：必须无气泡，否则菌落易在气泡处聚集，影响计数。
水样量：优先过滤 100 mL；菌落过多（>200 个）或过少时，调整水样体积或稀释倍数。
平行样：建议做2 份平行，结果取平均值，提高准确性。
质量控制：每批实验做阴性对照（无菌水过滤），确保无菌。
六、结果计算
菌落数（CFU/100mL）= 滤膜上典型菌落数 ×（100 mL /实际过滤水样体积）
例：过滤 50 mL 水样，菌落数为 8，则结果 = 8 × (100/50)=16 CFU/100mL
七、方法优缺点
优点：
快速、直接计数，结果直观
水样用量大，灵敏度高
可同时检测多个指标，效率高
缺点：
高浊度水样易堵塞滤膜，需预处理
对操作人员无菌操作要求高
北京百欧博伟生物技术有限公司拥有Biolog微生物鉴定系统，超低温冰箱，生物安全柜等仪器设备可进行对微生物分离、鉴定等常规的分子实验研究。对我国生命科学研究、生物技术创新和产业发展的需求进行积极的面对社会乃至国外收集保藏提供微生物菌种资源。在保证生物安全和保护知识产权的前提下，为工农业生产、卫生健康、环境保护、科研教育提供微生物物种资源、基因资源、信息资源和专业技术服务。
除此之外，我们还拥有对菌种、细胞、培养基、配套试剂等产品需求者的极优质服务，对购买项目的前期资料提供,中期合同保证,后期货物跟踪到最终售后的确保项目准确到位，都有相关人士进行维护,确保您在
微生物菌种查询网中获得最优质服务！也正因为此，北京百欧博伟生物技术有限公司与国内外多家研制单位、生物制药、第三方检测机构和科研院所院校、化工企业有着良好、长期和稳定的合作关系！
下载附件
上一篇：微生物分离之双层平板法的应用场景及操作要点有哪些？
下一篇：揭秘体内隐藏的青春守护者：看免疫细胞如何延缓衰老？