微生物的分离、纯化及培养技术
微生物菌种查询网 / 2015-12-25 09:43:46
微生物的分离、纯化及培养技术
分离与纯化：从混杂的微生物群体中获得只含某一种或某一株微生物的过程。
为什么要进行纯培养：平板上的单一菌落并不一定保证是一种菌。
常用的分离、纯化方法：
单细胞挑取法 稀释涂布平板法
稀释混合平板法 平板划线法
稀释涂布平板法 ：
步骤：
1、倒平板： 牛肉膏蛋白胨培养基，高氏I号培养基，查氏培养基冷却至55-60℃时，混匀后倒平板，牛肉膏蛋白胨培养基倒4皿，高氏I号培养基和查氏培养基各倒3皿。
2、制备污水稀释液：10g土样，加入90ml无菌水中，在三角瓶中振摇20min。取0.5ml 加入盛有4.5ml无菌水的试管中，以此类推，制成不同稀释度。
3、涂布：将上述每种培养基平板底面标记稀释度，然后用无菌吸管从最后三种稀释度，即10-4、10-5和10-6的试管中吸取0.1ml对号放入平板上，用玻棒涂布。
4、培养：高氏I号和查氏倒置培养于28℃培养箱中培养3-5days，牛肉膏蛋白胨琼脂培养基在37℃培养1-2days。
5、挑菌落：转至斜面，检查是否一致，保存。
平板划线法：
1、倒平板，标记培养基名称，编号和实验日期。
2、划线方法
稀释混合平板法 ：
1、先加菌
2、倒平板时注意培养基温度
3、混合均匀
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