巴西曲霉的形态特征与培养方法及实验内容！

巴西曲霉是Aspergillus属的微生物，原产地为美国。主要用途为研究；分析检测，具体用途为指示菌株。

一、菌种简介
平台编号：Bio-62436
提供形式：冻干物
拉丁属名：Aspergillus Brasiliensis
中文名称：巴西曲霉
属名：Aspergillus
种名加词：brasiliensis
其它中心编号：=ATCC 16404
来源历史：←美国ATCC
收藏时间：2004.7.16
资源归类编码：15151913102
模式菌株：非模式菌株
主要用途：研究；分析检测
具体用途：API验证用菌。
生物危害程度：四类
致病对象：无
培养基：Bé麦芽汁 1.0L，琼脂 15.0g，自然pH。
培养温度：28-30℃
资源保藏类型：培养物
保存方法：真空冷冻干燥法
实物状态：有实物
共享方式：公益性共享；资源纯交易性共享；合作研究共享；资源交换性共享
源数据主键：2463
用途：研究；分析检测；API验证用菌。
注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用（产品信息以出库为准）

二、形态特征
巴西曲霉，在LB培养基上28℃培养1天出现白色菌丝，培养到2天后，菌丝开始产生黑色孢子；转接传三代后培养一天，菌丝淡青色，培养到2天后，菌丝开始产生黑色孢子。 

三、培养方法
1、孢子制备
⑴放线菌孢子的制备
一般采用琼脂斜面培养基，培养基中含有一些适合产孢子的营养成分，如麸皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些无机盐等。碳源和氮源不要太丰富(碳源约为1％，氮源不超过0.5％)，碳源丰富容易造成生理酸性的营养环境，不利于放线菌孢子的形成，氮源丰富则有利于菌丝繁殖而不利于孢子形成。一般情况下，干燥和限制营养可直接或间接诱导孢子形成。放线菌斜面的培养温度大多数为28 ℃，少数为37 ℃，培养时间为5～14天。
⑵霉菌孢子的制备
霉菌的孢子培养，一般以大米、小米、玉米、麸皮、麦粒等天然农产品为培养基。这是由于这些农产品中的营养成分较适合霉菌的孢子繁殖，而且这类培养基的表面积较大，可获得大量的孢子。霉菌的培养一般为25～28 ℃，培养时间为4～14天。
2、种子制备
⑴摇瓶种子制备
摇瓶种子进罐，常采用母瓶、子瓶两级培养，有时母瓶种子也可以直接进罐。种子培养基要求比较丰富和完全，并易被菌体分解利用，氮源丰富有利于菌丝生长。原则上各种营养成分不宜过浓，子瓶培养基浓度比母瓶略高，更接近种子罐的培养基配方。
⑵种子罐种子制备
种子罐种子制备的工艺过程，因菌种不同而异，一般可分为种子、二级种子和三级种子的制备。孢子(或摇瓶菌丝)被接入到体积较小的种子罐中，经培养后形成大量的菌丝，这样的种子称为种子，把种子转入发酵罐内发酵，称为二级发酵。如果将种子接入体积较大的种子罐内，经过培养形成更多的菌丝，这样制备的种子称为二级种子，将二级种子转入发酵罐内发酵，称为三级发酵。同样道理，使用三级种子的发酵，称为四级发酵。

四、实验内容
1、称量→溶化→调pH→过滤→分装→加塞→包扎→灭菌→无菌检查 
2、干热灭菌:装入待灭菌物品→升温→恒温→降温→开箱取物 
3、高压蒸汽灭菌:加水→装物品→加盖→加热→排冷空气→加压→恒压→降压回零→排汽→取物→无菌检查 
4、过滤除菌:组装灭菌→连接→压滤→无菌检查→清洗灭菌

五、保存方法
1、传代保存法:培养基的浓度不宜过高,营养成分不宜过于丰富,尤其是碳水化合物的浓度应在可能的范围内尽量降低。培养温度通常以稍低于最适生长温度为好。若为产酸菌种,则应在培养基中添加少量碳酸钙 。
2、液体石蜡覆盖保存法:该法较前一种方法保存菌种的时间更长,适用于霉菌、酵母菌、放线菌及需氧细菌等的保存。
3、悬液保存法:
①蒸馏水保存法:适用于霉菌、酵母菌及绝大部分放线菌,将其菌体悬浮于蒸馏水中即可在室温下保存数年。本法应注意避免水分的蒸发。
②糖液保存法:适用于酵母菌,如将其菌体悬浮于10%的蔗糖溶液中,然后于冷暗处保存,可长达10年。除此之外,也可使用缓冲液或食盐水等进行保存。
4、常用的冷冻保存法：
①低温冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃)：低温冷冻保存时使用螺旋口试管较为方便，也可在棉塞试管外包裹塑料薄膜。保存时菌液加量不宜过多，有些可添加保护剂。此外，也可用φ5mm的玻璃珠来吸附菌液，然后把玻璃珠置于塑料容器内，再放入低温冰箱内进行保存的。
②干冰保存法(-70℃左右)：即将菌种管插入干冰内，再置于冰箱内进行冷冻保存。
③液氮保存法(-196℃)：是适用范围广的微生物保存法。

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