粘孢白僵菌的培养方法与实验步骤!
小杨 / 2021-11-26 09:16:47


粘孢白僵菌是Beauveria属的微生物,原产地为中国。菌落边缘不齐,表面不平,淡黄色,粉状。分生孢子球形、无色、光滑、孢子直径大多1.5-2μm;菌丝粗2μm;产孢细胞球形至瓶形,产孢轴较短,成“之”字形弯曲。主要用途为研究;教学。

一、菌种简介
平台编号:Bio-14398
提供形式:斜面培养物
英文名:Beauveria velata Samson&Evans
中文名称:粘孢白僵菌
属名:Beauveria
种名加词:velata Samson&Evans
来源历史:中国农业科学院农业环境与可持续发展研究所
原始编号:1415=DX-001-2 IEDA F1415
原产国:中国
资源归类编码:15151913104
模式菌株:非模式菌株
主要用途:a:2:{i:0;s:4:研究;i:1;s:4:生产;}
特征特性:7天:菌落直径14.09mm,菌落较小,边缘不齐,表面不平,淡黄色粉状。14天:菌落淡黄色,粉状。直径43.56mm。边缘不齐。分生孢子球形、无色、光滑、孢子直径大多1.5-2μm;菌丝粗2μm;产孢细胞球形至瓶形,产孢轴较短,成“之”字形弯曲。
具体用途:微生物杀虫剂研究、应用
生物危害程度:四类
致病对象:动物
致病名称:白僵菌病
传播途径:空气 土壤
分离基物:大腊螟
采集地:北京大兴东枣林村桃树
培养基编号1:0014
资源保藏类型:a:1:{i:0;s:6:培养物;}
保存方法:a:1:{i:0;s:14:真空冷冻干燥法;}
共享方式:a:1:{i:0;s:12:合作研究共享;}
用途:微生物杀虫剂研究、应用
注意事项:仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用产品信息以出库为准

二、菌种特性
粘孢白僵菌细胞圆球状,在直角两个平面交替分裂形成四联状,一般细胞成对生,单生者罕见,不成链状排列。革兰氏阳性,不运动,兼性厌氧。在MRS培养基上菌落小,呈白色。沿洋菜穿刺线的生长物呈丝状。接触酶阴性,不产细胞色素。功用产酸,菌群,维持肠道微生态平衡。在动物体内对病原微生物有颉颃作用,可竞争性地抑制病原微生物,,产生有益的代谢产物,激活酸性蛋白酶的活性,参与机体的,防止有害物质产生。

三、菌种的培养
1、菌种是指食用菌菌丝体及其生长基质组成的繁殖材料。菌种分为母种(一级种)、原种(二级种)和栽培种(三级种)三级。工业发酵的有用菌种,其筛选步骤包括菌种分离、初筛和复筛。
2、挑选具有某种能力的有用菌种,也称种子制备,是指菌种在一定条件下,经过扩大培养成为具有一定数量和质量的纯生产菌种的制备过程。以作接入发酵罐中进一步扩大菌体量及合成产物之用。
3、种子制备包括孢子制备和菌丝体制备 菌种制备。
4、保存在沙土管或冷冻管中的生产菌种,用无菌手续挑取少许,接入琼脂斜面培养基上,在25℃(或较高温度)下培养5~7天(或较长时间。所得孢子还需进一步用较大表面积的固体培养基以获得更多孢子(对于霉菌类孢子制备,多数采用大米、小米之类的天然培养基)。
5、将培养成熟的斜面孢子制成悬浮液,接种到扁瓶固体培养基上,于25~28℃培养14天。将成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入4℃冰箱中备用。一次制得的孢子瓶可在生产上延续使用半年左右。
6、如果有些生产菌种不产孢子,如赤霉素产生菌或产孢子不多的,则可采用摇瓶液体培养制得菌丝体,作种子罐的种子。种子罐的目的是使接入有限的孢子或菌丝体迅速发芽、生长、繁殖成大量菌体。其中的培养基组分应是易于被菌体利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米浆),及无机盐(如磷酸盐)等。作为发酵罐的种子应生命力旺盛、染色深、菌丝粗壮,无杂菌及异常菌体。接种量一般在10%~20%

四、实验内容
产品仅用于科研实验
1、称量→溶化→调pH→过滤→分装→加塞→包扎→灭菌→无菌检查 
2、干热灭菌:装入待灭菌物品→升温→恒温→降温→开箱取物 
3、高压蒸汽灭菌:加水→装物品→加盖→加热→排冷空气→加压→恒压→降压回零→排汽→取物→无菌检查 
4、过滤除菌:组装灭菌→连接→压滤→无菌检查→清洗灭菌

五、使用方法
直接加入配合饲料中或先按一定倍数稀释后,再加入饲料中混匀。也可预先活化后再发酵饲料或直接供动物饮用。具体用量参考产品使用说明。

六、注意事项
储存时,提高水分含量则菌群活力。高温制粒时,必须对产品进行包被处理。不饱和脂肪酸对乳酸片球菌具有颉颃作用,配合日粮中添加乳酸片球菌,应尽量避免与添加的油脂直接接触。饲料中的钙也会明显影响乳酸片球菌的活性。

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