枯草芽孢杆菌表达载体:pHT43
小杨 / 2020-07-28 08:36:21


                                                           

一、菌株简介
平台编号:bio-82352
规格:1ml甘油管1支,20ul质粒,一般次日下午
拉丁属名:宿主:DH5α,BL21
名称:pHT43 
宿主:DH5α,BL21  
培养方式:LB,37℃,氨苄 
保存类型:1ml甘油管,-80℃ 
描述:枯草芽孢杆菌表达载体 
规格货期:1ml甘油管1支,20ul质粒,一般次日下午
注意事项:仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

二、基本信息
质粒类型:枯草芽孢杆菌表达载体
高拷贝/低拷贝:高拷贝
启动子:Pgrac
克隆方法:多克隆位点,限制性内切酶
载体大小:8057 bp (查看载体序列)
5' 测序引物及序列:LacI-R:GGCATACTCTGCGACATCGT
载体标签:N-amyQ
载体抗性:氨苄和氯霉素
备注:pHT43载体通过IPTG诱导,能够高水平分泌表达目的蛋白。

三、质粒图谱
                                                          

四、载体描述
所有在枯草芽孢杆菌的groESL操纵子之前使强启动子与lac操纵子融合的载体都可通过加入IPTG进行诱导。尽管当未添加诱导物时表达组件的背景表达水平很低,还是成功从约1300种诱导因子中筛选出一种来使用bgaB报道基因(Phan等,2005)。当分别将htpG和pbpE基因融合到groE启动子时,加入IPTG后,表达的重组蛋白可能分别占细胞总蛋白的10%和13%(Phan等,2005)。热纤梭菌的amyQα-淀粉酶和纤维素酶A、B的高水平表达实验证实。该载体还插入了一个高效SD序列以及一个多克隆位点(BamH I, Xba I, Aat II, Sma I)。编码α-淀粉酶的amyQ基因的信号肽编码区域与pHT01的SD序列融合,构成了pHT43,以此获得分泌的重组蛋白。

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