3T3-L1 ,小鼠脂肪前体细胞 ATCC细胞库
中国微生物菌种查询网 / 2019-03-02 09:21:38

ATCC细胞库编号:bio-51509          
细胞株名称:3T3-L1 ,小鼠脂肪前体细胞
种属:swiss小鼠 
组织来源:胚胎
生长特性:贴壁生长
形态特征:成纤维样细胞
染色体:染色体众数为68-72。
支原体和其它微生物:(-)
细胞特征:L1是3T3的克隆亚株。细胞聚集并达到接触抑制的增值过程中,会发生前体脂肪细胞向脂肪细胞的转变。培养液中,高血清含量可以促进脂肪滴堆积。
培养条件:
完全培养基:90%DMEM(高糖,2mM L-glutamine)+10%新生牛血清 
ATCC推荐此细胞最好用新生牛血清(质量要好)。如果发现细胞状态不好时,可换胎牛血清调整。
培养温度:37℃, CO2:5%
传代方法:
    收到细胞后,在倒置显微镜下观察整个细胞生长情况:
    如果细胞未长满,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内,严格无菌操作,打开细胞培养瓶,吸出培养液,换 10ml新鲜培养液后继续培养。
如果细胞已长满(达80-90%),即可进行传代培养。具体步骤如下:
1. 弃去培养液,用不含钙、镁离子的PBS洗1-2次。
2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,倒转放于37℃培养箱1-3分钟预热,然后将培养瓶翻过来让胰酶与细胞面接触大约10-30秒后,在倒置显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量完全培养基终止消化。 
3. 按6-8ml/瓶补加完全培养基,轻轻打匀后吸出一半,分到新的培养瓶中。如果没有特别说明,收到细胞后的第一次传代一般是一传二。
注:1、观察细胞最好在低倍镜(4或5X物镜)下进行,否则不能准确判断细胞的传代密度。
2、瓶中运输培养基不能重复再用,请换用加双抗的新培养基,细胞冻存后,培养基中可不加任何抗生素。
3、有些细胞贴壁不牢,如发现贴壁细胞有脱落,可离心吹打后接种到新瓶内。
4、收到细胞后,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请及时与我们联系。
冻存方法:
  冻存液:90%完全培养液,10%DMSO。现用现配。
  储  存:液氮。
     中国微生物菌种查询网隶属于北京百欧博伟生物技术有限公司,成立于二〇一四年十月份,是一家专业提供中国微生物菌种,标准菌种,质控菌株,ATCC菌种,细胞系以及培养基等产品的查询网站!自成立至今,已提供各类微生物菌种、细胞、培养基数量达四万余份,接待咨询客户数量5万余人次,成交合同数量2万余份!是国内微生物菌种及细胞信息最全的网站! 我们拥有自主研发能力,提供的ATCC菌种达15000余份,ATCC各类细胞系达3000余份,保藏中心涵盖菌种资源更达数十万余份!

  • 上一篇:微生物常用染色法及染色程序!
  • 下一篇:小鼠神经干细胞 Mouse neural stem cells