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艾氏甲烷球菌
Methanococcus aeolicus 拉丁名
ATCC BAA-1280 编号
Strain DesignationsATCC菌种别名 Nankai-3
Isolation 分离基物
Sediment, saltwater
isolation date: 2003
Biosafety Level 安全等级 1
Biosafety classification is based on U.S. Public Health Service Guidelines, it is the responsibility of the customer to ensure that their facilities comply with biosafety regulations for their own country.
Product Format 提供形式 frozen
Preceptrol no
Genome Sequenced Strain
Methanococcus aeolicus Nankai-3, complete genome.
Type Strain 模式菌株 yes
Comments Genome sequenced strain
Medium 培养基 ATCC Medium 1439: Methanogenium medium
Growth Conditions 生长条件
Atmosphere 需氧情况 : hydrogen (H2), 80%; carbon dioxide (CO2), 20%
Temperature 培养温度 : 37.0°C
Name of Depositor 寄存人 M Kendall
Special Collection 来源国家 ATCC
Isolation 分离基物
培养基：ATCC?Medium1439：Methanogenium
成长条件：气氛：氢气（H2），80％;二氧化碳（CO2），20％
传播程序
1.用70％乙醇喷洒Balch管顶部，然后燃烧顶部。
2.将试管中的气体换成80％H2 20％CO2，不要超过5psi加压。如果管子过压（20磅/平方英寸），接种管子将很困难。
3.用于接种的预备管：如果培养基是粉红色的（参见关于刃天青B的讨论），每100ml培养基中加入2.0ml还原剂（5％辅酶M储备溶液）。在接种之前，让培养基在室温下静置至少1小时或直至刃天青变为无色。
4.在温和的厌氧气体流下将冷冻小瓶打开。使用厌氧（参见E）1.0ml注射器用22ggege针头倾斜，从小瓶中取出细胞悬浮液并转移到ATCC＃1439培养基的管中。将0.5ml接种的培养物转移到第二管ATCC培养基＃1439中。用80％H 2 20％CO 2将培养管加压至20psi。将0.1ml接种的培养物加到非选择性培养基上，在37℃有氧培养。将培养管在37oC孵育。
5.应在4到6天内在肉汤中检测到生长。在好氧板上不应检测到生长。
厌氧条件：
A.Balch管（可从Bellco Glass，Vineland，NJ获得;专门用于厌氧工作并使用铝压接帽将橡胶塞固定到位。针可以很容易地通过塞子插入，管可以加压到或者，可以使用血清小瓶，或者使用带有丁基橡胶塞的螺旋盖管，在后一种情况下，可以移除塞子并将管放置在套管系统下，该套管系统分配无菌的无氧气体以添加还原剂或接种。
B.Resazurin是一种常用的氧化还原指示剂，当氧化还原电位高于50 mv时为粉红色，当氧化还原电位低于110 mv时为无色。即高度减少。最严格的厌氧菌需要这种低氧化还原电位才能实现最佳生长。
C.为了获得完全还原的培养基，培养基必须是缺氧的并且添加还原剂。常见的还原剂是硫化钠，半胱氨酸，二硫苏糖醇，柠檬酸钛和辅酶M。
D.我们建议在接种培养基之前至少一小时将还原剂加入培养基中。辅酶M（巯基乙磺酸）（100×溶液）：将5.0g溶于100ml去离子水中。分配到螺旋盖试管中，每管56毫升，并在氮气下用橡胶塞密封。高压灭菌消毒。多余的管可以在室温下储存长达2个月。辅酶M是由许多产甲烷菌产生的化合物。一些产甲烷菌对强还原剂如硫化钠敏感。辅酶M是我们在使用产甲烷菌时使用的标准还原剂。
E.Syringes可以通过两种方法之一制成无氧的。