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细胞系描述 |
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细胞库编号:bio-51532 种属:人 组织来源:支气管 生长特性:贴壁生长 形态特征:上皮细胞样 安全性:此细胞带腺病毒和SV40病毒,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需高压灭菌后方能丢弃。 细胞系特征:腺病毒和SV40病毒永生化的人支气管上皮细胞。 微生物,支原体检测:阴性
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培养条件:
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完全培养基:LHC-8或LHC-9(Invitrogen)无血清培养基。 培养条件:37℃ , CO2:5% |
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传代方法:
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收到细胞后,取出培养瓶在倒置显微镜下观察细胞生长情况: 如果细胞未长满,用75%酒精喷洒整个瓶后放到超菌台内,严格无菌操作,打开细胞培养瓶,吸出培养液,加新的 10ml培养液在瓶内继续培养。 如果细胞已长满,即可进行传代培养。具体步骤如下: 1. 弃去培养液,用PBS(不含钙,镁离子)洗1-2次。 2. 加0.5ml消化液(0.125%Trypsin-0.25mM EDTA)于培养瓶中,倒转放于37度培养箱1-3分钟预热,然后又将培养瓶倒转过来大约30秒后,在倒置显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆分散,轻敲几下培养培养瓶,细胞随即脱落下来。 3. 加入6-8mlDMEM+10%FBS培养液或1-2ml胰酶抑制剂,吸入离心管,离心(1000转,6分钟),弃上清, 加10mlLHC-8将细胞重悬,分到新的培养瓶中。一传二或三。 、观察细胞最好在低倍镜( 2、瓶中运输培养基不能重复再用,请换用加双抗的新培养基,细胞冻存后,培养基中可不加任何抗生素。
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冻存方法: |
冻存液:90%完全培养液,10%DMSO.现用现配 储存:液氮储存 |
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