创伤弧菌属革兰氏阴性弧菌。在液体培养基中菌体大小为0.7*2-3μm,稍弯曲。在固体培养基中呈多样性。有极端单鞭毛。 培养特性:营养要求一般,最适生长温度为30℃,兼性厌氧。在无NaCl及超过8%NaCl的培养基中不生长,可在0.5%NaCl及3%NaCl的蛋白胨水中生长,在含6%NaCl的蛋白胨水中生长良好.
非冷冻样品采集后应立即置7℃~10℃冰箱保存,尽可能及早检验;冷冻样品应在45 ℃以下不超过15 min或在2℃~5℃不超过18 h解冻;如果样品需要冷冻贮存,应在样品中加等量缓冲甘油-氯化钠溶液(液体样品应加双料),推荐贮存温度为-70 ℃以下。
甲壳类,则应先在自来水中洗刷外壳并甩干表面水分,然后以无菌操作打开外壳,按上述要求取相应部分。
以无菌操作取检样25 g(mL),加入3%氯化钠碱性蛋白胨水225 mL,用旋转刀片式均质器以8 000 r/min均质1 min,或拍击式均质器拍击2 min,制备成1:10的均匀稀释液。如无均质器,则将样品放入无菌乳钵中磨碎,然后放在500 mL的灭菌容器内,加225 mL 3%氯化钠碱性蛋白胨水,并充分振荡。鱼类和头足类动物取表面组织、肠或鳃。贝类取全部内容物,包括贝肉和体液;甲壳类取整个动物,或者动物的中心部分,包括肠和鳃。
嗜盐性试验:挑取纯培养的单个可疑菌落,分别接种于不同氯化钠浓度的胰胨水,36 ℃±1 ℃培养24 h,观察液体混浊情况。创伤弧菌在无氯化钠、8%氯化钠和10%氯化钠的胰胨水中不生长,在6%氯化钠的胰胨水中生长旺盛。
氧化酶试验:挑选纯培养的单个菌落进行氧化酶试验,创伤弧菌为氧化酶阳性。
涂片镜检:将可疑菌落涂片,进行革兰氏染色,镜检观察形态。创伤弧菌为革兰氏阴性,呈棒状或弧状。
挑取纯培养的单个可疑菌落,转种3%氯化钠三糖铁琼脂斜面并穿刺底层,36 ℃±1 ℃培养24 h观察结果。创伤弧菌在3%氯化钠三糖铁琼脂中的反应为底层变黄不变黑,无气泡,斜面颜色不变或红色加深,偶尔斜面变黄。
V-P试验:以接种针由3%氯化钠三糖铁琼脂斜面挑取少许培养物穿刺3%氯化钠MR-VP培养基,36℃±1 ℃培养24 h,在加V-P试剂前应先观察动力。沿穿刺线周围呈扩散性生长为动力阳性。
ATCC菌种名称:创伤弧菌
Vibrio vulnificus (Reichelt et al.) Farmer emend. West et al. 拉丁名
(ATCC? 27562?) 菌种编号
Strain Designations 菌种别名: 324 [CDC B9629] /
Type Strain 菌株编号: yes /
Biosafety Level 生物安全等级 : 2
Strain Designations 菌种别名 324 [CDC B9629]
Application 用途
Control Culture
Produces hemolysins
Control strain for detection of Vibrio vulnificus
Characterization
Enteric Research
Waterborne pathogen research
Isolation分离源 Human blood, Florida, United States
Type Strain 模式菌株 yes
Biosafety Level 生物安全等级 2
Product Format 提供形式 freeze-dried
Storage Conditions 保藏方法
Frozen(冷冻物): -80℃ or colder
Freeze-Dried(冻干物): 2℃ to 8℃
Live Culture: See Propagation Section
Preceptrol? no
Type Strain 模式菌株yes
Comments 注释 Electrophoretic analysis of lipopolysaccharides
Medium 培养基 ATCC? Medium 2: Marine agar 2216 or marine broth 2216
Growth Conditions 生长条件
Temperature 培养温度 : 30℃
Atmosphere 需氧情况 : Aerobic
Name of Depositor 收藏者 P Baumann
Chain of Custody 来源国家 ATCC <-- P Baumann <-- RE Weaver
Isolation 分离源 Human blood, Florida, United States
References 参考文献 Okada K, et al. Variability of haemolysin(s) produced by Vibrio vulnificus. J. Gen. Microbiol. 133: 2853-2857, 1987. PubMed: 3449599
Farmer JJ III. Vibrio ("Beneckea") vulnificus, the bacterium associated with sepsis, septicaemia, and the sea. Lancet 2: 903, 1979. PubMed: 90993
Reichelt JL, et al. Study of genetic relationships among marine species of the genera Beneckea and Photobacterium by means of in vitro DNA/DNA hybirization. Arch. Microbiol. 110: 113-114, 1976.
Farmer III JJ. Revival of the name Vibrio vulnificus. Int. J. Syst. Bacteriol. 30: 656, 1980.
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