细胞复苏步骤
中国微生物菌种查询网 / 2017-08-14 09:11:34

细胞复苏

1. 将装有冻存细胞的冻存管从液氮罐中取出,立即放入37℃水浴中;

2. 37℃水浴中轻轻转动冻存管,直到冻存管内仅剩余一小块冰芯,使细胞迅速解冻(1分钟内);

3. 将冻存管转移到超净工作台内;打开盖子前,用75%酒精擦拭冻存管外部;

4. 将解冻的细胞逐滴转移到装有适量经过预热、适合该细胞系的完全生长的培养基的离心管内;

5. 以大约200×g的离心力将细胞悬液离心3-5分钟;实际离心速度和时间取决于细胞种类;

6. 离心后,检查上清液是否清澈,有无完整的细胞沉淀;在无菌条件下,小心倒掉上清液,不要搅动细胞沉淀;

7. 轻轻将细胞重新悬液在完全生长培养基中,然后转移到合适的偏倚容器和推荐的培养环境中(注:培养瓶尺寸取决于冻存管冻存的细胞数量,培养环境取决于细胞和培养基类型)。


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