链格孢属的生物特性与种级分类标准及注意事项！
小杨 / 2024-01-03 08:52:24
链格孢属(Alternaria Nees)是全球分布最广，经济上重要的半知菌类真菌之一。95%以上的种类兼性寄生于植物上，引起多种植物病害，造成全球性的田间和产后巨大的经济损失，链格孢还会引起水果腐霉病。
一、菌种简介
提供形式：冻干物/培养物
拉丁属名：Alternaria Sp.
拉丁名称：Alternaria sp.
来源历史：←湖南轻工研究院有限责任公司（6.277）
收藏时间：2008/9/22
资源归类编码：15151912101
模式菌株：非模式菌株
主要用途：研究
特征特性：菌落质地呈绒状。基部菌丝白色，后变为青灰色，中心隆起有同心圆，反面青黑色。分生孢子梗透明或橄榄褐色，基部细胞稍大，顶端膨大呈截状，隔膜多，单生或束生。分生孢子近椭圆形或近矩形，橄榄褐色，表面有小刺，具横纵隔膜。
生物危害程度：四类
培养基编号：CM0077
培养基名称：5 °Bé麦芽汁琼脂
培养基成分：5°Bé麦芽汁 1.0L，琼脂 15.0g，自然pH。
培养温度：28-30℃
培养时间：5-7天
需氧类型：好氧
保存方法：真空冷冻干燥法
共享方式：公益性共享；资源纯交易性共享；合作研究共享；资源交换性共享
用途：研究；
注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用（产品信息以出库为准）
二、培养基
PDA
三、生物特性
营养菌丝分隔，在分生孢子梗上向顶发育产生典型的链状分生孢子，分生孢子梗和体细胞菌丝很相似，暗色的梨型分生孢子通常既有横隔又有纵隔。
链格孢属（Alternaria C. G. Nees）。菌丝细长，分枝，淡色至褐色，具隔膜，菌丝体大部分埋生，部分表生。分生孢子梗由菌丝顶端生成，或从菌丝侧生，或生于子座上，通常比菌丝粗，色深，简单或有时分枝，直或弯曲，单生或数根丛生。产孢细胞生于分生孢子梗及其分枝的顶端，顶部具一产孢孔，以内壁芽生孔生式（eb-tret）产孢，随着多次产孢作合轴式延伸，使分生孢子梗作膝状曲折，孢子脱落后留下清晰的孢痕，孢痕周边色深，中央色淡。分生孢子倒棒形、卵形、倒梨形、椭圆形或近圆柱形，与产孢细胞的接触面大，孢子基部钝圆形，脐部明显。孢身褐色、青褐色或黄褐色，具横、纵或斜的真隔膜，光滑或具疣、刺，分隔处无缢缩或缢缩，顶端无喙或延伸成喙。喙呈单细胞柱状，锥状或多细胞柱状或纤细的长丝状，较孢身色淡或近无色，简单或分枝。凡转变为次生分生孢子梗产孢者称为假喙，否则为真喙。孢子可连续产生次生分生孢子，形成长的或短的、分枝或不分枝的孢子链。
四、种级分类标准
Neergaard（1945）等相继提出链格孢菌种级分类标准，张天宇等（1997）综合前人和他们研究结果，提出下列分类标准。
第一，分生孢子是种级分类的主要依据，但其形态、大小等变幅很大，易受基质和其他培养条件的影响。因此，在观察描绘计量时应注意：尽量选用自然基质（标本）上长出的孢子，必须培养时可采用营养相对贫乏的PCA（马铃薯20g，胡萝卜20g，琼脂15g，水1000mL）或TWA＋WS（水1000mL，琼脂15～20g，灭菌后的麦秆放于琼脂板上），在光暗交替条件下培养；选孢子个体发育充分，处于鼎盛时期的孢子，避免选用生长中的幼小孢子或过老畸形孢子；随机选择孢子避免有意多选大个或小个孢子，隔膜多或隔膜少的孢子，尽量客观地反映实际情况。
分生孢子的基本形状为倒棒形、卵形或倒梨形，其形状虽有较大变化，但一个种绝大多数孢子形状是有特征性的，是种级分类有用标准。种内孢子大小变幅可以较大，相近种间孢子大小可能有交叉，但这一特征仍是分种的可靠性状和常用标准之一。横隔膜多少变幅较大，但纵、斜隔膜变幅较小，不同种之间孢子分隔数目，特别是纵、斜隔膜数目差别较大是一个有用的分种性状。分隔处是否隘缩也是一些种间区别的特征。孢子颜色是有一定的参考价值。孢子表面的纹饰很难用于种级分类。因为几乎所有链格孢属的种，都可形成表面有纹饰的孢子，或表面有纹饰和光滑的孢子可能出现在同一培养菌株中。孢子单生或成链着生，形成短链（2～5个孢子）或长链（5～10个孢子或更多），孢子链分枝与否，这是一个明显的在一定条件下相对稳定的特征，所以孢子成链特征是一类非常有用的属下分组和种级分类特征。孢子顶端有无喙及其形态是种级分类的有用标准。李多川等（1993）将链格孢属的喙部分为六个类型：无喙、单细胞假喙、柱状假喙、柱状真喙、锥状真喙、丝状真喙。
第二，分生孢子梗的形态一般无种间特异性，其长度因基质和外界条件不同有较大变化，但其直径变化较小，可做为某些种间的区别特征。某些种的孢子梗常发生一次或数次分枝，也有一定的鉴别价值。
第三，
链格孢属中不同种间的菌丝特异性很小，在培养中有的可形成特征性的厚垣孢子，可作为区别一些种的鉴别特征。
第四，不同种间在菌落形态、色泽和生长速度等常有一些差别，但作为种级鉴别特征意义不大。
第五，自然寄主（基质），绝大多数链格孢种发生于植物性基质上，在自然条件下常发生于一定属或科的植物寄主上，即一定科、一定属植物上常被一定种的链格孢所寄生。少数种对基质的选择不严格，适应性广，表现腐生性强。链格孢中大孢子和长喙种类一般寄生性较强，引起症状特征明显，对寄主范围的选择性也较强。而小孢子种类对寄主范围偏宽。
五、保藏条件
斜面菌种和冻干菌种应在2-8°C保存。西林瓶菌种请置于-20℃冷冻。
六、注意事项
1）冻干首次活化，干粉要全部用完，不能预留，用0.3ml的培养液或无菌水溶解，接种在1-2支平板上，因冻干粉处于休眠状态，请勿接种多支平板，以避免因接种量不足而导致复苏不成功；或直接接种液体培养基，则试管斜面不超过5ml为宜。 经过冷冻干燥保藏，菌种处于休眠状态，复苏培养时可能会延迟生长，这时需较长的培养时间； 若您收到的是已复苏的培养物（非冻干菌），则可以直接用于您的实验，或根据需要转接培养；如有不明白之处，请务必先咨询我单位技术人员，避免不必要的损失；
2）微生物菌种应保藏于低温、清洁干燥的地方，室温放置时间过长会导致菌种衰退；
3）菌种操作应在无菌条件下进行；转种完毕，应经灭菌再做丢弃处理；
4）应根据菌种状况及时转接，冻干菌种保藏时间通常为2-25年；
5）菌种使用过程中如出现杂菌污染或菌种生产性能下降，应及时和
微生物菌种查询网联系。
6）如若有菌种复苏不活或者污染等情况，请在收到菌钟后2个月内联系，逾期不予受理；
7） 打管操作需由专业微生物技术人员在相应的防护设备中进行，生物危害程度为三类的菌种应在生物安全柜中操作，打管时冻干管应远离面部，保护眼睛。
8）西林瓶开封：用 75%酒精棉擦拭西林瓶外部，在安全柜内使用尖嘴钳去除塑料盖及铝盖， 注意不要同时打开胶塞。缓慢开启胶塞，用 75%酒精棉消毒瓶口部分，使用无菌吸管注入 0.5ml适宜的液体培养基复溶冻干粉末。
9）安瓿瓶开封：用浸过75％酒精的脱脂棉擦净安瓿管，用火焰加热其顶端，滴少量（2-3滴）无菌水至加热顶端使之破裂，用锉刀或者镊子敲下已破裂的安瓿管顶端并将冻干管开口处在火焰上过一遍，并保持在火焰旁操作。
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