32D小鼠IL-3依赖性细胞的培养方式与质量检测!
小杨 / 2023-06-29 08:39:21


一、细胞简介
平台编号:Bio-69708
规格:1×10⁶Cells/T25培养瓶
细胞信息:32D/32D Clone 3
细胞名称:32D(32D 小鼠 IL-3 依赖性细胞)
物种:大鼠
组织:骨、骨髓
细胞形态:半贴壁半悬浮,淋巴细胞样
细胞背景:32D 细胞是从小鼠骨髓中分离出来的淋巴细胞。
细胞描述:小鼠 IL-3 依赖性细胞 
细胞特性:悬浮生长 
培养基:RPMI 1640+10%FBS+mouse IL3
培养条件:37℃,5% CO2 
用途:鼠 国内
注意事项:仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用(产品信息以出库为准)

二、培养方式
1、培养基:32D 细胞专用培养基【1640+10% FBS+1% P/S+10ng/mL mIL-3】
2、培养环境:37℃、5%CO2
3、复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入 5mL 培养基混合均匀。在 1000RPM 条件下离心 5 分钟,弃去上清液,补加 4-6mL 完全培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入 6cm 皿中),培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
4、传代培养:当细胞密度达到 80%以上时,可以进行传代,传代比例 1:2~1:4,1~2 天传代一次。
(1)用移液器吹打细胞,形成单细胞悬液,然后将其转移到 15ml 的离心管,1000rpm 离心5min;
(2)离心完成后,吸出上清丢弃,再用移液管取 10ml 完全培养基将细胞重悬,轻轻吹打混匀;
(3)将细胞悬液分装到两个新的 T25 细胞培养瓶中,放在 37℃的 CO2培养箱中进行培养。
5、细胞冻存:使用本公司无血清冻存液可直接将细胞冻存在-80℃(无需使用程序降温盒),细胞在-80℃可保存 3 年,长期保存建议使用液氮罐。 

三、质量检测
1、细胞鉴定:种属正确
2、细菌检测:阴性
3、支原体检测:阴性

四、售后服务
1、收到细胞后请及时查看瓶身有无破损,是否漏液等现象;
2、用 75%的酒精喷洒培养瓶之后,放在培养箱中静置 2-4 小时以稳定细胞状态,然后用显微镜观察细胞状态并拍照记录,40 倍和 100 倍照片各一张(细胞在运输过程中存在少量的漂浮或者死亡属于正常现象);
3、原瓶中的培养基在细胞传代之后不建议继续使用,请配制新的完全培养基或者购买本公司的专用培养基;
4、建议定期对细胞进行拍照记录;收到细胞后 7 天内,对细胞生长状态有任何问题,可申请售后。
5、强烈建议:在第一次细胞传代时,使用附赠或者购买本公司配置的细胞培养瓶将细胞按照 1:2 进行传代,可以对比测试自配的培养基是否可以养好细胞。如果有以上任何问题,请及时联系本公司。

五、注意事项
1、收到细胞后,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
2、收到细胞先不开瓶盖,瓶身擦拭酒精后放在培养箱静置2-4小时(视细胞密度而定)稳定细胞状态。接着在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收细胞时就整体外观拍一张照片,观察培养基的颜色和是否有漏液情况,随后在显微镜下拍下细胞状态,100*,200*各一张),观察记录细胞在运输过程中是否有污染情况。作为我方进行销售依据。
3、由于细胞状态受环境、操作和运输等多方面因素影响,故本公司只保证客户收到细胞后一周内的细胞状态,故客户需要售后时需出示收到细胞的时间证明及客户提供收货时间和发现问题后客服人员沟通的时间证明,期间间隔时间不能大于7天。
4、所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
5、客户在细胞培养过程中,有任何技术问题可以拨打技术售后服务电话:010-53515223,我们随时给予解答。

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