人喉表皮癌细胞复苏与冻存的处理方法有哪些?
小杨 / 2022-10-13 09:34:40


细胞简介
平台编号:Bio-73045
规格:1×10⁶Cells/T25培养瓶
细胞信息:HEp-2
细胞名称:HEp-2(人喉表皮癌细胞) 
种属:人 
年龄(性别):
组织来源:
生长特性:贴壁 
细胞形态:上皮细胞样 
背景描述:最初认为,HEp-2细胞源自喉上皮癌,但随后通过同功酶分析、HeLa标记染色体和DNA指纹分析发现,HEp-2细胞的起源是HeLa细胞污染的。HEp-2细胞角蛋白免疫过氧化物酶染色阳性。 
生长培养基:MEM+10% FBS+1% P/S
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5% 温度:37℃
用途:研究
注意事项:仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用(产品信息以出库为准)

收到复苏好的贴壁细胞的处理方法
1、先从外包装盒拿出细胞瓶,在细胞瓶表面喷一层酒精,并小心去掉封口膜;
2、产品仅用于科研在显微镜下观察细胞状态,并确定是否染菌,如有染菌,请立即拍照,并将细胞丢掉;
3、将培养瓶置于37°C,5% CO2的无菌培养箱中培养4-6小时;
4、倒掉多余的培养基,留正常体积的培养基;
5、重新将培养瓶置于37°C,5% CO2的无菌培养箱中培养过YE;

收到冻存细胞的处理方法
1、HEp-2人喉表皮癌细胞37°C水浴预热培养基;
2、从液氮中取出细胞迅速放入37°C水浴快速解冻(解冻后不要继续暖细胞);
3、在超净台中加入5ml培养基重悬细胞,1000rpm离心5min;
4、弃上清,加入5ml培养基重悬细胞后转入T25培养瓶中,轻轻晃匀;
5、置于37°C,5% CO2培养箱中培养(培养瓶盖没有透气孔的话,瓶盖不要拧太紧);
6、用新鲜的培养基给细胞换液后继续培养。

细胞的运输和保存
视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满完全培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。

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