大鼠神经星形胶质细胞的应用!
小杨 / 2020-06-13 08:34:54


一、背景

大鼠神经星形胶质细胞是神经胶质形成的主要功能细胞。神经胶质在大脑发育早期向成熟阶段转化的过程中产生。当程序性细胞死亡时,或在大脑发育的过程中,中枢神经系统受损或受到病理损坏时,神经胶质可做为大脑的巨噬细胞。胶质细胞能在类组织相容性复合体表达阳性T细胞时表达抗原,能进行介导的巨噬作用,并且与造血细胞和巨噬细胞组织共享抗原。大鼠神经星形胶质均来自正常大鼠脑组织,采用胰酶消化制备而来。

大鼠神经星形胶质细胞分离自新生1-2d的大鼠脑组织,刚分离时细胞呈圆形,24h后大部分细胞贴壁,均匀分布于瓶底,部分细胞伸出细小突起,培养4-5d后细胞数量明显增多,呈扁平,多角形,胞质丰富且核浆较少,细胞核呈椭圆形,偏于胞体一侧。星形胶质细胞是中枢神经系统的重要细胞组成,不仅具有支持功能,还能够合成及分泌多种神经活性物质,在维持神经元内外环境、生存、迁移、免疫调节、信号转导、轴突生长及功能整合等方面具有重要作用。

大鼠神经星形胶质细胞是胶质细胞中体积最大的一种。从胞体发出许多长而分支的突起,伸展充填在神经细胞的胞体及其突起之间,起支持和分隔神经细胞的作用。纤维性星形胶质细胞多分布在脑脊髓的皮质,突起细长,分支较少,胞质中含,多分布在灰质,细胞突起粗短,分支多。胞质内胶质丝较少,又称苔状细胞。

电镜下星形胶质细胞的胞核有缺失,胞质较清亮,游离核糖核蛋白体和粗面内质网均很少,糖原颗粒丰富,有大量的胶质丝。纤维形星形胶质细胞的突起呈长圆柱形,而原浆性星形胶质细胞的突起呈薄片状,并常包裹着神经细胞及其突触。星形胶质细胞的脚板与血管内皮细胞之间相隔一层基板,脚板质膜与基板接触处有半桥粒结构。

二、大鼠神经星形胶质细胞注意事项:

1、培养基于4℃条件下可保存3-6个月。

2、在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。

3、传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。

4、该细胞只可用于科研。

三、应用

大鼠星型胶质细胞培养可以:
(1)用于神经系统发育、分化及再生等基础研究;
(2)脑缺血预处理上调神经保护蛋白的机制研究;
(3)脑损伤和脑疼痛的研究;
(4)新蛋白的功能研究。

慢性脑缺血是指各种原因引起的长期的脑血流灌注不足,是血管性痴呆(vascular dementia VD)、Binswanger病等多种脑血管疾病发生发展过程中的一个共同病理过程,临床上主要表现为渐进性的痴呆,学习、记忆和空间辨别能力明显下降,神经病理的改变除了神经元的变性坏死外,还有胶质细胞的改变。中枢神经系统内的胶质细胞和神经元共同形成一个统一的有机体,胶质细胞参与神经元功能的调节,并在联系和维持神经元生存微环境中起着重要作用。脑缺血缺氧后,胶质细胞与神经元之间的平衡受到破坏,其结果必然威胁到神经元的稳定性。

当中枢神经系统出现缺血性病损时,神经胶质细胞在形态、数量和一系列神经分子生物学上发生明显改变,以完成代偿、再生和修复等一系列功能。而且,胶质细胞(包括星形胶质细胞和小胶质细胞)参与了慢性脑缺血后的炎症反应,与一氧化氮、自由基等参与了脑损伤的过程,因此研究胶质细胞及其反应在慢性脑缺血后脑损伤中的作用,寻求有效的保护措施具有重要的意义。

丁咯地尔是一种有多种药效学特性的血管活性药物,目前广泛用于脑血管病的治疗。但是,对于丁咯地尔对慢性脑缺血后认知功能和胶质细胞的影响却少有报道,本实验拟用慢性脑缺血大鼠模型,观察慢性脑缺血大鼠认知功能、神经元及胶质细胞的变化,以探讨慢性脑缺血后脑损伤的机制及胶质细胞的反应,并应用丁咯地尔进行干预,观察其神经保护作用,为临床上预防及治疗与慢性脑缺血有关的疾病提供实验支持和理论依据。

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