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实验一 实验目的
学习食用菌菌科的菌种及分级标准；掌握食用菌三级菌种的制备方法。
实验二、 实验原理
菌种是食用菌生产的基础，只有优良的菌种才可能由良好的收成。食用菌的菌种制作在生产实践上通常分3步：将自行分离的纯种或从专业单位购买的试管斜面菌种扩大繁殖而成的试管斜面菌种称为母种（一级菌种）；将母种在以木屑、棉籽壳或谷粒等为主的培养料上扩大繁殖而成的瓶（袋）装菌种称为原种(二级菌种);将原种或扩大繁殖而成的直接用于栽培的瓶（袋）装菌种称为栽培种或生产种(三级菌种) 栽培种所用的培养基配方和制作方法与原种基本相同。制作原种的目的一是为了扩大种量，满足生产上的需要；二是让菌丝对各种秸秆类基质具有适应能力，并在适应的同时产生各种酶类； 三是在培养过程中还可以对菌种的生命力、纯度等进行检验，存优弃劣。若生产规模较小、用种量不大时，也可直接将原种用于生产。
经过三级培养，食用菌菌丝体数量大大增加。一般1支试管母种可以繁殖 4~6 瓶原种，每瓶原种可扩接化60~100瓶(袋)以满足生产上对菌种的大量需求。
三、实验材料
1，食用菌母种: 平菇试管菌种5~7支。
2，培养料配方：棉籽壳78%,麸皮(或米糠)20%,蔗糖1%，石膏粉1%，料水比1:1.2。
注:原料一定要新鲜、无霉变、干燥、洁净。
3，器材:灭菌锅，超净工作台，接种用具，台秤，盆子，菌种瓶，聚丙烯塑料袋(直径15 cm,厚度0.004 5 cm),袋口套盖(套环+海绵盖)。
四、实验方法
（一）培养料的配制
按上述配方取原料，把麸皮、石膏拌匀，洒在棉籽壳上反复拌2-3次进行混合;蔗糖用水溶化，掺到适量水中，拨洒在干料上，充分翻拌均匀，使料的含水量达60%-65%(即用手紧握培养料，手指缝用有水珠渗出但不形成水流）。
（二）培养料的分装及灭菌
配置好的培养料均匀装人菌种瓶(用于原种制作）或菌种袋（用于栽培种制作）中。装料时要求松紧适当，同时振动瓶身，装至瓶肩或袋肩，压平料面，再用尖形木棒后，用赶紧的纱布将菌种瓶和菌种袋外壁残留的培养料擦干净（一面接种后感染杂菌） ， 菌种瓶用聚丙烯塑料膜扎口；菌种袋用配套的套环和海绵盖直接封口，0.14MPa湿热灭菌1.5~2h，冷却后备
（三）原种的制作
用蛋豆大的母种放于原种培养瓶中培养料面的孔洞处，包扎瓶口，放到培养架上25℃左右避光培养。注意通风换气，室内相对湿度65%~70%，每天检查瓶内发菌状况，检出污染瓶。一般经20~ 30d，菌丝可长满菌种瓶，即可得原种。(质量标准：菌丝体浓白、粗壮、有菇香、无异味，与培养料紧密结合，瓶颈有水珠，不得有干缩现象。菌种菌龄适宜，如果瓶壁有黄水等均为菌龄过长，不得再作菌种使用）。
（四）栽培种的制作
用接种匙取枣粒大小原种一块放于培养袋中培养料面的孔洞处，套盖封口，25℃左右发菌培养。 保持通风、暗光条件;室内相对湿65%~70%，每天检查袋内发菌状况，检出污染袋。一般经20~30 d,菌丝可长满菌种号即可得到三级种(栽培种)(质量标准:菌丝洁白、密集粗壮，上下部生长均匀,在培养蔓延时齐头并进,无明显菌丝束,菌丝顶泌无色透明水珠;后期在培养料表层不结菌皮