百欧博伟生物芽孢染色的操作方法介绍！
中国微生物菌种查询网 / 2018-09-26 15:33:56
芽孢染色法
方法1
(1)加1～2滴自来水于小试管中，用接种环从斜面上挑取2～3环培养18～24h的枯草芽孢杆菌菌苔于试管中，并充分混匀打散，制成浓稠的菌液。
(2)加5%孔雀绿水溶液2～3滴于小试管中，用接种环搅拌使染料与菌液充分混合。
(3)将此试管浸于沸水浴(烧杯)中，加热15～20min。
(4)用接种环从试管底部挑数环菌于洁净的载玻片上，并涂成薄膜，将涂片通过微火3次固定。
(5)水洗，至流出的水中无孔雀绿颜色为止。
(6)加沙黄水溶液，染2～3min后，倾去染液，不用水洗，直接用吸水纸吸干。
(7)干燥后用油镜观察。芽孢绿色，菌体红色。
方法2
(1)取37℃培养18～24h的枯草芽孢杆菌作涂片，并干燥，固定。
(2)于涂片上滴人3～5滴5%孔雀绿水溶液。
(3)用试管夹夹住载玻片在火焰上用微火加热，自载玻片上出现蒸汽时，开始计算时间约4～5min。加热过程中切勿使染料蒸干，必要时可添加少许染料。
(4)倾去染液，待玻片冷却后，用自来水冲洗至孔雀绿不再褪色为止。
(5)用0.5%沙黄水溶液(或0.05%碱性复红)复染lmin，水洗。
(6)制片干燥后用油镜观察。芽孢呈绿色，菌体红色。
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