跟百欧博伟生物一起探讨小肠结肠炎耶尔森氏菌的检验(ATCC菌种）
中国微生物菌种查询网 / 2018-09-14 08:59:45
菌种拉丁名：Yersinia enterocolitica subsp.
ATCC菌种名称：小肠结肠炎耶尔森氏菌
菌株编号：ATCC 23715 菌株别名：Billups-1803-68
小肠结肠炎耶尔森氏菌为革兰氏阴性杆菌或球杆菌，大小为1-3.5×0.5-1.3μm，多单个散在，有时排列成短链或成堆。对于小肠结肠炎耶尔森氏菌的检验科分为以下几步。
一、设备和材料
除微生物实验室常规灭菌及培养设备外,其他设备和材料如下:
1 冰箱:0℃~4℃。
2 恒温培养箱:26℃±1℃、36℃±1℃。
3 显微镜:10倍~100倍。
4 均质器。
5 天平:感量0.1g。
6 灭菌试管:16mm×160mm、15mm×100mm。
7 灭菌吸管:1mL (具0.01mL刻度)、10mL (具0.1mL刻度)。
8 锥形瓶:200mL、500mL。
9 灭菌平皿:直径90mm。
10 微生物生化鉴定试剂盒或微生物生化鉴定系统。
二、培养基和试剂
1、尿素培养基
2、改良Y培养基(AgarY,Modified
3、改良磷酸盐缓冲液
4、CIN-1培养基(CepulodinIrgasanNovobiocinAgar
5、改良克氏双糖培养基
6、营养琼脂。
7、小肠结肠炎耶尔森氏菌诊断血清。
8、糖发酵管
9、鸟氨酸脱羧酶试验培养基
10、半固体琼脂。
11、缓冲葡萄糖蛋白胨水[甲基红(MR)和V-P试验用。
三、操作步骤
1、改良克氏双糖试验
分别挑取5.3中的可疑菌落3个~5个,分别接种于改良克氏双糖铁琼脂,接种时先在斜面划线,再于底层穿刺,26℃±1℃培养24h,将斜面和底部皆变黄且不产气的培养物做进一步的生化鉴定。
2、增菌
以无菌操作取25g(或25mL)样品放入含有225mL改良磷酸盐缓冲液增菌液的无菌均质杯或均质袋内,以8000r/min均质1min或拍击式均质器均质1min。液体样品或粉末状样品,应振荡混匀。均质后于26℃±1℃增菌48h~72h。增菌时间长短可根据对样品污染程度的估计来确定。
3、分离
将乳与乳制品增菌液或经过碱处理的其他食品增菌液分别接种于CIN-1琼脂平板和改良Y 琼脂平板,26℃±1℃培养48h±2h。典型菌落在CIN-1上为深红色中心,周围具有无色透明圈(红色牛眼状菌落),菌落大小为1mm~2mm,在改良Y琼脂平板上为无色透明、不黏稠的菌落。
四、检验程序（见下图）
