百欧博伟生物和您一起制备微生物检测培养基
中国微生物菌种查询网 / 2018-09-11 09:51:36
如何正确的制备微生物检测培养基呢？今天小编携百欧博伟生物和您一起来制备。
一、称取
用精确度1/100的电子天平称取培养基所需药品。先根据配方计算出配制一定量培养基所需各种成分药品的量，然后用天平准确称取。称量时用称量纸折叠成簸箕状盛放药品。
二、溶化
培养基放入烧杯或搪瓷缸中，慢慢加入少量所需水，边加入边用玻棒搅拌。如果培养基中不含有琼脂，培养基不需要加热；如果含有琼脂，则需要用本生灯或电磁炉加热煮沸，完全溶解后，再补齐所需水，并搅拌均匀（如图3所示）。如果配制的培养基量很大，可用不锈钢锅加热溶化，可先用温水加热并随时搅动，防止焦化，如有焦化现象，配制的培养基就不能使用，要重新配制。
配制培养基时不可用铜或铁的容器溶化，因铜或铁制容器可能会使培养基中的铜和铁的含量超标，影响实验（培养基中铜含量大于0.3mg/L，细菌不宜生长，铁含量超过0.14mg/L，妨碍细菌产毒素）。对容易发生反应，产生沉淀的药品，要分开溶解，最后加入培养基，如磷酸氢二钾和硫酸镁。
三、调pH
虽然培养基中含有缓冲物质成分，能使培养基的pH尽可能的保持在要求的范围内，但是配出的培养基若不符合要求，就要进行必要的调整。如果有已校准pH计，可用pH计，如果没有，可用精密的pH试纸，再根据需要用1 mol/L氢氧化钠或1mol/L盐酸（微调可用0.1氢氧化钠或0.1mol/L盐酸）调制所需的pH。培基的pH一般为7.4～7.6，也有酸性或碱性的。用氢氧化钠调整的需要高压灭菌的培养基，在调整pH时要调至高出所需0.1个～0.2个单位，因用氢氧化钠调整时，高压灭菌后，培养基的pH要降低0.1~0.2。如培养基中含有碳酸钙成分，可不pH。
四、过滤
配成的培养基，若无特殊要求，可省略此步。若有沉淀或浑浊．需要澄清的．液体培养基可用油纸过滤。而固体培养基可用中间夹一薄层脱脂棉的双层纱布过滤。如果过滤法还不能达到澄清的要求，则可用蛋清澄清法，即培养基加热冷却到50~60℃，装入三角瓶内（不超过容量的二分之一），按1000mL加人1个～2个鸡蛋的蛋清，用力摇晃3-5min，高压蒸汽灭菌121℃、20min，取出趁热过滤即可。
五、分装
配制好的培养基根据不同的用途分装在三角瓶、试管等容器中，分装试管，如果试管量很大，可用自动分液器，如果试管量少，可用漏斗分装。分装量不超过容器容积的三分之二。三角瓶以不超过容积的二分之一为宜；琼脂斜面以不超过试管长度的五分之一为宜，灭菌后，摆成的斜面为培养基量的三分之一，底层为三分之二的量为宜；半固体琼脂分装量为试管长度的三分之一；用来接种或保菌的高层琼脂，分装量为试管长度的四分之一或三分之一，用来接种厌氧菌的要达到三分之二；琼脂平板，内径为90mm的以13mL~15 mL为宜，内径70mm的平板为8mL~10 mL，制成的琼脂平板若表面水分较多，可将平板倒扣，放置在37℃培养箱内30min，干燥后再用。每批培养基应另外分装一小玻璃瓶（约20mL）与该批培养基同时灭菌，为测定该批培养基最终pH。 中国微生物菌种查询网特设ATCC板块是ATCC菌种保藏中心，专业提供ATCC菌种的保藏，查询以及购买服务。
正确制备出微生物检测培养基大致就以上这五个步骤了。1、称取，2、溶化，3、调pH，4、过滤，5、分装.很简单吧，小伙伴们实验室走起！