PC-12(未分化型) 大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞
中国微生物菌种查询网 / 2016-05-05 11:29:56
细胞库编号:KCB200735YJ
细胞株名称:PC-12(未分化型) 大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞
种属:大鼠 性别:雄性
细胞系特征:该细胞系来自可移植的雄性大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤。 这些细胞表达神经生长因子(NGF)受体,NGF可诱导该细胞产生可逆性的神经细胞表型。 此细胞不合成肾上腺素,但可产生儿茶酚胺、多巴胺和去甲肾上腺素。
组织来源:肾上腺嗜铬细胞瘤
生长特性:成团半悬浮和贴壁混合生长
微生物,支原体检测:阴性
安全性:所有肿瘤和病毒转染的细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需高压灭菌后方能丢弃。
培养条件:
完全培养基:含2mM L-谷氨酰胺,1.5克/升碳酸氢钠的F12K或1640,85%;马血清 10%;胎牛血清 5%。
培养温度:37℃; CO2:5% 。
传代方法:
收到细胞后,取出培养瓶在倒置显微镜下观察细胞生长情况。
1.用75%酒精喷洒整个培养瓶,放入无菌工作台中,严格无菌操作。
2.将培养液和细胞全部吸入离心管,离心(1000转/min,10min)。
3.加入10ml新鲜的完全培养液,继续培养。
拍打后还贴壁的细胞按以下步骤处理:
1. 收集培养液后,用不含钙、镁离子的PBS洗1-2次。
2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,倒转放于37℃培养箱1-3分钟预热,然后将培养瓶翻过来让胰酶与细胞面接触大约10-30秒后,在倒置显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量完全培养基终止消化。
3. 按5ml/瓶补加完全培养基,轻轻打匀后吸出一半,分到新的培养瓶中。如果没有特别说明,收到细胞后的第一次传代一般是一传二。
4. 以后细胞传代均按以上方法操作。
注:
1、瓶中运输培养基不能重复再用, 请换用加双抗的新培养基,细胞冻存后,培养基中可不加任何抗生素。
2、有些细胞贴壁不牢,如发现贴壁细胞有脱落,可离心吹打后接种到新瓶内。
3、收到细胞后,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请及时与我们联系。
冻存方法:
冻存液:90%完全培养液或牛血清,10%DMSO 。现用现配。
储 存:液氮储存
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