乳酸杆菌琼脂培养基的保存方法及其注意事项有哪些？
小杨 / 2025-12-24 09:23:08
乳酸杆菌琼脂培养基的保存核心是保持无菌、减少营养成分降解、避免水分流失，需根据培养基状态针对性处理，以下是详细保存方法及注意事项：
一、液态母液（灭菌后未倒平板）的保存
适用于暂时不使用，需后续按需倒板的场景，保存周期较短：
1、保存条件：
灭菌后趁热分装至无菌试剂瓶（避免冷却后琼脂凝固），瓶口用无菌硅胶塞密封，标注培养基名称、配制日期。
置于 4℃冷藏冰箱 保存，避免冷冻（冷冻会导致琼脂凝固后破裂，解冻后成分不均）。
保存期限：7-10 天，超过后营养成分（如葡萄糖、酵母浸粉中的维生素）会逐渐降解，且可能滋生污染菌（即使冷藏也无法完全抑制缓慢生长）。
2、使用前处理：
取出后置于水浴锅（50-60℃）中加热融化，搅拌均匀，确认无沉淀、无异味（若出现浑浊、异味则已污染，需丢弃）。
若 pH 有偏差，可在融化后冷却至 40-50℃时微调，再倒平板。
二、凝固平板（已倒板）的保存
最常用的保存形式，方便直接接种使用：
1、保存前预处理：
平板凝固后（约 30 分钟），立即倒置（避免表面水珠滴落导致菌落扩散），放入无菌保鲜袋或密封盒中（防止水分蒸发和交叉污染）。
标注培养基类型、配制日期（建议用马克笔写在皿底，避免皿盖模糊）。
2、保存条件：
核心环境：4℃冷藏冰箱（避光保存，避免阳光直射，紫外线会破坏营养成分）。
湿度控制：密封袋内可放入 1-2 张湿润的无菌滤纸（避免平板水分过快流失，导致表面干裂），但需注意滤纸不接触平板表面（防止污染）。
3、保存期限：
普通平板：1-2 周，超过后平板会逐渐干燥、营养耗尽，乳酸杆菌生长效果下降。
含选择性添加物的平板：7 天内使用完毕，抑制剂会随时间降解，抑菌效果减弱，杂菌易污染。
4、使用前处理：
取出后置于超净工作台内，倒置放入 37℃恒温培养箱中“复温 + 烘干”1-2 小时（去除表面冷凝水珠，避免接种后菌落扩散；同时让培养基温度接近菌种最适生长温度，利于生长）。
若平板表面已干裂、出现杂菌菌落或异味，直接丢弃，不可使用。
三、长期保存（如需长期备用）
若需延长保存时间，可采用“冷冻干燥”或“分装冻存”，但操作较复杂，适用于实验室大量储备：
1、冷冻干燥保存（针对纯培养基粉末）：
未灭菌的干粉培养基：密封后置于阴凉干燥处（温度 < 25℃，湿度 < 60%），避免受潮结块，保质期 1-2 年（参考原料保质期）。
灭菌后的液态培养基：需在无菌条件下冷冻干燥（去除水分），制成干粉，密封后常温保存，使用时用无菌水复溶、融化即可，保质期 6-12 个月。
2、分装冻存（针对液态培养基）：
灭菌后冷却至 40-50℃，分装至无菌冻存管（每管 10-20mL），密封后快速放入 - 20℃冷冻（避免缓慢冷冻导致琼脂结晶）。
保存期限：3-6 个月，解冻时置于 37℃水浴快速融化，搅拌均匀后倒平板，若出现分层需重新加热融化。
四、保存关键注意事项
无菌优先：所有保存容器（试剂瓶、保鲜袋、冻存管）必须无菌，操作过程避免接触非无菌表面，防止污染。
避免反复冻融：液态母液或冻存的培养基不可反复加热融化 - 冷藏/冷冻，会导致琼脂降解、营养成分破坏，且易滋生污染菌（建议分装成小份，一次用完一份）。
禁止室温长期存放：室温下培养基（尤其是液态）易滋生杂菌，且营养成分降解速度快，即使是干粉培养基，室温潮湿环境也会结块变质。
定期检查：冷藏保存期间，每周检查一次，若发现平板表面发霉、液态母液浑浊，立即丢弃，避免污染其他培养基。
适配菌种特性：乳酸杆菌偏好酸性环境，保存时无需调整 pH（倒板前已按配方调好），若保存过久 pH 升高（因乙酸钠等成分分解），使用前需重新微调至 5.5-6.8。
北京百欧博伟生物技术有限公司拥有对菌种、细胞、培养基、配套试剂等产品需求者的极优质服务，对购买项目的前期资料提供,中期合同保证,后期货物跟踪到最终售后的确保项目准确到位，都有相关人士进行维护,确保您在
微生物菌种查询网中获得最优质服务！也正因为此，北京百欧博伟生物技术有限公司与国内外多家研制单位、生物制药、第三方检测机构和科研院所院校、化工企业有着良好、长期和稳定的合作关系！
下载附件
上一篇：微生物在哪些特定分离培养基上会产生独特的生长现象？
下一篇：嗜盐菌选择性琼脂培养基的使用效果及注意事项有哪些？