实验室无菌环境保障——解决微生物污染难题!
小杨 / 2023-06-01 08:53:43


百欧博伟生物:无菌室空白验证长菌落了,是不是无菌室灭菌不彻底呢?那我们的无菌室应该用什么方式灭菌呢?

首先我们应该了解无菌室应该处于什么状态,有什么要求?

一般情况下,无菌室应达到空间洁净度10000级,但操作区域例如超净工作台、生物安全柜里需要达到洁净度100级,也就是我们常说的“整体万级,局部百级”。

万级洁净度对空间落菌的要求是:静态检测,自然沉降菌≤3CFU/皿;

百级洁净度对空间落菌的要求是:静态检测,自然沉降菌≤1CFU/皿。

也就是说平时我们做的空间验证,只要不超过这个标准,就是符合要求的,因此也不必太过担忧。

怎样能够保证无菌室符合要求?当无菌环境中出现异常应该如何处理?

我们得先从无菌室的灭菌方式开始讲。一般无菌室的灭菌方式分为:紫外线照射、臭氧灭菌、化学熏蒸这几种。这几种灭菌方式各自有各自的特点,大家可以根据自己的实际情况来选择合适的灭菌方式,遇到异常难以解决时,也可以考虑增加一种灭菌方式来解决。

紫外线照射:紫外线灭菌是利用适当波长的紫外线破坏微生物机体细胞中的DNA或RNA结构,造成生长性细胞死亡来达到灭菌效果,属于一种物理方式的灭菌,也是微生物无菌室最常用的灭菌方式。该方法操作简单,使用方便,也比较经济,可以杀灭各种微生物,包括细菌、病毒、真菌、立克次体以及支原体等,因此在实验室里,是最常见的灭菌方式。

但紫外线灭菌也有一定的缺点,紫外线只能对直接照射到的微生物起到杀灭作用,因此只能对空间中照射到的地方起作用,一些照射不到的死角或者物品的内部是无法达到效果的,因此使用紫外线灭菌的无菌室,也会辅助以一些化学试剂来对死角进行清理消毒。

臭氧灭菌:臭氧是一种强氧化剂,灭菌过程属生物化学氧化反应。

使用臭氧灭菌,杀菌彻底,无残留,杀菌广谱,可杀灭细菌繁殖体和芽孢、病毒、真菌等,并可破坏肉毒杆菌毒素。另外,O3对霉菌也有极强的杀灭作用。O3为气体,能迅速弥漫到整个灭菌空间,灭菌无死角。所以,臭氧灭菌也是目前被广泛使用的灭菌方式。用臭氧消毒空气,必须是在封闭空间,且室内无人条件下进行,消毒后至少过 30min 才能进入。另外臭氧的密度比空气大,在空气中会迅速下降到空间的底层,因此臭氧发生器也应当安装在无菌室的顶部。一般灭菌时间选择30min即可,要求空间中臭氧浓度不低于20mg/m3。

化学熏蒸:化学熏蒸是一种十分传统的空间灭菌方式,一般是采用易挥发气化的化学物质的蒸汽对空间微生物进行杀灭的目的,一般常用甲醛、戊二醛、过氧化氢、过氧乙酸等。

这里以甲醛熏蒸为例。一般甲醛熏蒸又称甲醛高锰酸钾熏蒸,将40%的甲醛溶液加入到高锰酸钾溶液中,二者发生反应,放出大量的热使甲醛蒸发到空间中,从而对无菌室进行灭菌。但是甲醛熏蒸的缺点也是很明显的,因为甲醛是一种强致癌性的化学品,对人体的伤害较大,在使用过程中需要特别注意,并且残留量也要进行严格的控制。每次甲醛熏蒸后,至少需要通风24h才可以使用。

了解了这几种常用的无菌室灭菌方式,在我们日常的工作中也可以根据自己实验室情况进行选择,尤其是长期使用一种灭菌方式若是灭菌效果达不到理想的效果时,可以根据实际情况更换灭菌方式,或者引进一种新的灭菌方式两者结合,以期达到预想的效果。

可以用于洁净区空间消毒,制药生产区的A/B区灭菌、C/D区消毒,无菌室空气消毒,微生物实验室空间灭菌,生物安全实验室空间灭菌等需要空间消毒灭菌的地方。也可用在无菌传递舱、无菌隔离器及冻干机等小空间的灭菌。

1、A/B区高效灭菌:可以实现对黑色枯草芽孢杆菌6个log的杀灭效果

2、迅速灭菌,只需2-3个小时即刻完成整个灭菌过程

3、残留验证资料充分,极低的腐蚀性,对人体安全,腐蚀性小,完美替代甲醛

4、使用灵活,操作简便,便于携带,非常适合制药企业使用

5、验证资料齐全,残留性验证,兼容性验证完备,采用后提供供模板,易于通过新版高标准。

微型灭菌仪需具备以下几个特点:

1、多级雾化、超纳米扩散、真正无孔不入;

2、使用过程无需电源线,即开即用;

3、消毒和静置时间短,可节约大量的人力;

4、单掌可托,便携,前所未见,仅重2KG左右;

5、一次性消毒液体使用设计,彻底避免二次污染;

6、能够杀灭包括芽孢、病毒、冠状病毒、霉菌在内等多种微生物;

7、材料兼容性极佳,对设备的腐蚀性极小,对人员也没有任何影响,对环境无污染。

8、具备国际认证。

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