胞外多聚物鞘氨醇单胞菌的培养条件与打管说明！
小杨 / 2024-03-16 09:57:53
胞外多聚物鞘氨醇单胞菌是Sphingomonas属的微生物，原产地为中国。革兰氏阴性、无芽孢的直杆状。单极毛运动。接触酶阳性、菌落为黄色，但不是黄单胞菌素。专性需氧。主要用途为分类学研究，具体用途为模式菌株。
一、菌种简介
规格：冻干物
拉丁属名：Sphingomonas Sanxanigenens
拉丁名称：Sphingomonas sanxanigenens
来源历史：←国内收集
收藏时间：1998/11/13
原始编号：NY981114
资源归类编码：15131139103
模式菌株：非模式菌株
主要用途：研究；生产
特征特性：菌体呈球状至杆状，单个、成对或呈短链状排列，革兰氏阴性。
具体用途：生产黄原胶。
生物危害程度：四类
培养基编号：CM0002
培养基名称：营养肉汁琼脂
培养基成分：蛋白胨 5.0g，牛肉浸取物 3.0g，NaCl 5.0g，琼脂 15.0g，蒸馏水 1.0L，pH7.0。[注] 培养芽孢杆菌时加入5mg MnSO4·H2O，则有利于产生芽孢。
培养温度：30℃
需氧类型：好氧
保存方法：真空冷冻干燥法
共享方式：公益性共享；资源纯交易性共享；合作研究共享；资源交换性共享
用途：研究；生产；生产黄原胶。
注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用（产品信息以出库为准）
二、储存条件
冻干菌种和试管斜面请置于 2-8℃冷藏。西林瓶菌种请置于-20℃冷冻。甘油请置于-80℃
三、培养条件
1、培养基编号：营养肉汤琼脂（Nutrient Agar）
2、培养基成分： 蛋白胨 5.0 g牛肉浸粉 3.0 g NaCl 5.0 g 琼脂 15.0 g 蒸馏水 1000.0 mL pH 7.0培养芽胞杆菌时加入 5 mg MnSO4·H2O，则有利于产生芽胞。以上成分 121℃，灭菌 15 min。液体培养基不添加琼脂。推荐使用成品培养基。
3、需氧类型：好氧
4、培养温度：30 ℃
四、注意事项
1、菌种常规培养时间：细菌 1-2 天，酵母 3 天，霉菌 5-7 天，大型真菌 7-10 天。
2、试管斜面菌种请尽快转接，不建议长期存放。
3、初次使用时请按照本说明书推荐条件进行复活培养，如使用其它类型培养基或培养条件造成菌种不活等损失，我单位不负责任。
4、使用者应保证菌种的安全存储和操作，带菌废弃物应高压灭菌处理后丢弃。
5、菌种使用过程中如出现杂菌污染或菌种生产性能下降，应及时和
微生物菌种查询网联系或更换新的菌种。
五、打管说明书
1、安瓿瓶开封：用浸过 75％酒精的脱脂棉檫试冻干管表面进行消毒，将管顶端于酒精灯外焰上均匀加热；立即滴 2-3 滴无菌水于加热部位，使管壁破裂；再用镊子或其他适宜工具敲下破裂处。
2、菌株恢复培养：用无菌吸管吸取 0.5ml 左右液体培养基(固体培养基去掉琼脂即可)于冻干管中将冻干菌粉全部溶解。将溶解后的菌悬液转移至盛有 4~5mL 液体培养基的试管中混匀，可将残留在吸管中 1-2 滴菌悬液转接至固体培养基上。将液体试管和斜面试管于推荐条件下静置培养。以液体培养结果为准。
3、注意事项：菌种活化前，请将安瓿管保存在 2-8℃的环境下，某些菌种经过冷冻干燥保存后处于休眠状态，延迟期较长，需要转接至 2-3 代恢复活力。
4、复苏后的菌种在传 1-2 代后使用。
5、暂不启开的安瓿管应于 4℃中保藏（特殊除外）。
6、冻干管打开后需一次用完，不能留存。
7、打管操作需由专业微生物技术人员在相应的防护设备中进行，生物危害程度为三类的菌种应在生物安全柜中操作，打管时冻干管应远离面部，保护眼睛。
8、打管操作应在烧杯或托盘上方进行，用完冻干管应灭菌处理后丢弃。
9、如若有菌种复苏不活或者污染等情况，请在收到后 2 个月内联系，逾期不予受理。
10、甘油管使用：使用本甘油菌时可以不用完全融解，在甘油菌表面蘸取少量涂板或进行液体培养即可。也可以完全融解后使用，但随着冻融次数的增加，细菌的活力会逐渐下降。
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