ATCC 15538菊糖芽孢乳杆菌冻干管打管说明书！
小杨 / 2024-03-07 09:16:15
菊糖芽孢乳杆菌，革兰氏染色呈阳性，以周生鞭毛运动。芽孢产生稀少，椭圆形，中生，膨大。兼性厌氧，但在大气中生长贫乏。糖类同型发酵产D-乳酸。不产接触酶和氧化酶。最适温度35℃，从鸡饲料和土壤中分离到，也可能广泛分布于环境中。
一、菌种简介
提供形式：冻干物
拉丁属名：Sporolactobacillus Inulinus
属名：Sporolactobacillus
种名加词：inulinus
来源历史：←DSMZ←K. Kitahara, EU
培养基编号：54，厌氧
培养温度：37
模式菌株：模式菌株
主要用途：研究
生物危害程度：四类
致病对象：无
分离基物：家禽饲料
培养基：酪胨 10.0g，牛肉粉 8.0g，酵母粉 4.0 g，葡萄糖 20.0 g，硫酸镁 0.2 g，乙酸钠 5.0 g，柠檬酸三铵 2.0 g，磷酸氢二钾 2.0 g，硫酸锰 0.05 g，吐温80 1.0 g，蒸馏水 1000mL。pH6.2±0.2。
培养温度：30℃
资源保藏类型：培养物
保存方法：-80℃冰箱冻结法；真空冷冻干燥法
实物状态：有实物
共享方式：公益性共享；资源纯交易性共享；合作研究共享；资源交换性共享
用途：模式菌株、生产D-乳酸
注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用（产品信息以出库为准）
二、培养基
MRS 培养基
酪蛋白胨 10 克 牛肉浸取物 10 克
酵母提取液 5.0 克 葡萄糖 20 克
乙酸钠 5.0 克 柠檬酸二铵 2.0 克
吐温 80 1.0 克 磷酸氢二钾 2.0 克
七水硫酸镁 0.2 克 七水硫酸锰 0.05 克
碳酸钙 20.0 克 琼脂 20.0 克
蒸馏水 1.0 升 PH 6.8
如果要配制液体培养基，则不用加入碳酸钙和琼脂
三、保藏条件
斜面菌种和安瓿瓶冻干菌种应在 2-8°C 保存。西林瓶菌种请置于-20°C 保存。甘油请置于-80°C。请勿长期置于室温。
四、注意事项
1）冻干首次活化，干粉要全部用完，不能预留，用无菌吸管吸取 0.3ml 的培养液（即以上建议的培养基配方，不加琼脂）或者无菌水，滴入冻干管中，轻轻振荡至其溶解。吸取全部菌悬液，接种在培养基上（建议不超过 2 支斜面或平板；或直接接种液体培养基，以不超过 5ml 为宜）；
2）经过冷冻干燥保藏，菌种处于休眠状态，复苏培养时可能会延迟生长，这时需较长的培养时间；若您收到的是已复苏的培养物（非冻干菌），则可以直接用于您的实验，或根据需要转接培养；如有不明白之处，请务必先咨询我单位技术人员，避免不必要的损失；二次接种量要多，固体斜面培养基水分要少才能让菌体长得比较明显，液体培养要静止培养；
3）微生物菌种应保藏于低温、清洁干燥的地方，室温放置时间过长会导致菌种衰退；
4）菌种操作应在无菌条件下进行；转种完毕，应经灭菌再做丢弃处理；
5）应根据菌种状况及时转接，冻干菌种保藏时间通常为 2-25 年；
6）菌种使用过程中如出现杂菌污染或菌种生产性能下降或者不活等情况，请在收到菌种后2 个月内联系，逾期不予受理；
7）打管操作需由专业微生物技术人员在相应的防护设备中进行，生物危害程度为三类的菌种应在生物安全柜中操作，打管时冻干管应远离面部，保护眼睛；
8）安瓿瓶开封：用浸过 75％酒精的脱脂棉擦净安瓿管，用火焰加热其顶端，滴少量（2-3滴）无菌水至加热顶端使之破裂，用锉刀或者镊子敲下已破裂的安瓿管顶端并将冻干管开口处在火焰上过一遍，并保持在火焰旁操作。
五、冻干管打管说明书
1、安瓿瓶开封：用浸过 75％酒精的脱脂棉擦净安瓿管，用火焰加热其顶端，滴少量（2-3 滴）无菌水至加热顶端使之破裂（应避免过多水蒸气影响菌种的复苏），用锉刀或者镊子敲下已破裂的安瓿管顶端。
2、用无菌吸管吸取 0.3ml（建议勿超过 0.5ml）适宜的液体培养基(不添加琼脂)，滴入管内，轻轻振荡，待安瓿管内的菌体溶解呈悬浮状，在用无菌吸管吸取全部菌悬液接在 1-2 支建议的培养基试管中（不超过 2支，单位所提供的培养基配方中有琼脂，请务必做成试管斜面，配方中没有琼脂，试管中液体培养基不超过 5ml），并在建议的条件下静止培养。冻干管打开后需一次用完，不能留存。
3、另外，安瓿管内大部分是用牛奶做保护剂，里面菌体为少数，复苏时要全部菌悬液接在新鲜培养基上，否则可能造成复苏不成功。打管操作需由专业微生物技术人员在相应的防护设备中进行，生物危害程度为三类的菌种应在生物安全柜中操作，打管时冻干管应远离面部，保护眼睛。
4、打管操作应在烧杯或托盘上方进行，用完冻干管应灭菌处理后丢弃。菌种复苏时，请务必记录好菌种的编号和制备批号，否则不予售后如若有菌种复苏不活或者污染等情况，请在收到菌种后 2 个月内联系，逾期不予受理。
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