侧孢短芽孢杆菌:用于研究和生产及抑制金黄色葡萄球菌
小杨 / 2023-09-18 09:36:02


侧孢短芽孢杆菌,杆状,G+,形成椭圆形内生芽孢,好氧。可耐1%-7%NaCl浓度。主要用于研究,生产,抑制金黄色葡萄球菌。

一、菌种简介
平台编号:Bio-59492
提供形式:冻干物
拉丁属名:Brevibacillus Laterosporus
中文名称:侧孢短芽孢杆菌
属名:Brevibacillus
种名加词:laterosporus
来源历史:←中国农业大学食品学院(LQ61)
收藏时间:2007.1.31
原始编号:TF1
资源归类编码:15131311101
模式菌株:非模式菌株
主要用途:研究;生产
具体用途:抑制金黄色葡萄球菌
特征特性:杆状,G+,形成椭圆形内生芽孢,好氧。可耐1%-7%NaCl浓度。麦芽糖、半乳糖、木糖、果糖产酸;葡萄糖、蔗糖、乳糖、海藻糖、甘露醇、棉子糖不产酸。不分解淀粉,接触酶、氧化酶阳性。    
生物危害程度:四类
致病对象:无
分离基物:土茯苓
采集地:北京
培养基:酵母提取物 0.5g,甘露醇 20.0g,KH2PO4 0.2g,K2HPO4  0.8g,MgSO4.7H2O 0.2g,CaSO4·2H2O 0.1g,FeCl3 微量,Na2MoO4·2H2O 微量,琼脂 15.0g,蒸馏水 1.0L,pH7.2。
培养温度:35-37℃
资源保藏类型:培养物
保存方法:真空冷冻干燥法
实物状态:有实物
共享方式:公益性共享;资源纯交易性共享;合作研究共享;资源交换性共享
源数据主键:21185
用途:研究;生产;抑制金黄色葡萄球菌
注意事项:仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用(产品信息以出库为准)

二、形态特征
在延迟期,短芽孢杆菌为革兰氏染色阴性,菌体呈细长的杆状;在对数生长期,为革兰氏染色阳性,菌体成短而粗的杆状;在静止期,革兰氏染色又转为阴性,菌体成细长的杆状,偶尔也能观察到椭圆形的芽孢。图1是50号菌用1%H2SO4(pH6.8)负染后的电镜照片:菌体杆状、周生鞭毛、大小约0.88μm×2.2μm。

三、生理生化特征
不从碳水化合物产气;不水解淀粉;兼性厌氧,葡萄糖培养液中培养物的pH小于8.0。

四、生防特点
作为非脊椎动物的病原菌,有关研究人员曾报道了这种细菌的杀线虫能力,由于所报道的这些侧孢短芽孢杆菌菌株都不产生伴孢晶体,所以这些菌株的杀线虫毒力因子并非来自于具有特征性的伴孢晶体。然而,Smirnova TA,et al.分离到了2株能形成大的伴孢晶体的侧孢短芽孢杆菌菌株,这两株菌显示出很强的杀昆虫能力,研究证实,这种能力与菌体在形成芽孢过程中的伴孢晶体相关。有趣的是,Singer的实验表明,一株侧孢短芽孢杆菌的杀线活性源于一个热稳定蛋白的毒性。所有这些研究表明,不同侧孢短芽孢杆菌菌株拥有不同的线虫致病因子。牛秋红研究小组分离到的侧孢短芽孢杆菌G4菌株具有显著的杀线虫功能,但其并不产生伴孢晶体。从该菌株的发酵液里提取的粗蛋白酶液在12h内能杀死所有测试线虫并在24h内完全降解。从侧孢短芽孢杆菌G4菌株中纯化出的丝氨酸胞外蛋白酶可水解多种底物,包括胶原和线虫体壁,具有很强的杀线虫能力,组织病理电镜实验证实这种蛋白酶严重破坏了线虫体壁。而且,蛋白酶将线虫体壁分解成为一些氨基酸或小肽,这些营养物使病原细菌更好的生长繁殖。该蛋白酶基因异源表达的菌株表现出了明显的杀线虫活性,重组蛋白酶在体外对线虫体壁降解,而蛋白酶缺失菌株丧失了大部分的杀线活性,死亡线虫在生测中保持了完整的体壁,表明蛋白酶在线虫侵染中起主要作用。

五、注意事项
1)冻干粉首次活化,干粉要全部用完,不能预留,用无菌吸管吸取 0.3ml 的培养液(即以上建议的培养基配方,不加琼脂)或者无菌水,滴入冻干管中,轻轻振荡至其溶解。吸取全部菌悬液,接种在培养基上(建议不超过 2 支平板或者斜面,若接种液体培养基,则试管液体不超过 5ml 为宜);
2)经过冷冻干燥保藏,菌种处于休眠状态,复苏培养时可能会延迟生长,这时需较长的培养时间; 若您收到的是已复苏的培养物(非冻干菌),则可以直接用于您的实验,或根据需要转接培养如有不明白之处,请务必先咨询我单位技术人员,避免不必要的损失;
3)微生物菌种应保藏于低温、清洁干燥的地方,室温放置时间过长会导致菌种衰退;
4)菌种操作应在无菌条件下进行;转种完毕,应经灭菌再做丢弃处理;
5)应根据菌种状况及时转接,冻干菌种保藏时间通常为 2-25 年;
6)菌种使用过程中如出现杂菌污染或菌种生产性能下降或不活,请在收到后 2 个月内和微生物菌种查询网联系,逾期不予受理;
7)打管操作需由专业微生物技术人员在相应的防护设备中进行,生物危害程度为三类的菌种应在生物安全柜中操作,打管时冻干管应远离面部,保护眼睛。
8)安瓿瓶开封:用浸过 75%酒精的脱脂棉擦净安瓿管,用火焰加热其顶端,滴少量(2-3滴)无菌水至加热顶端使之破裂,用锉刀或者镊子敲下已破裂的安瓿管顶端并将冻干管开口处在火焰上过一遍,并保持在火焰旁操作。
9)甘油管使用:使用本甘油菌时可以不用完全融解,在甘油菌表面蘸取少量涂板或进行液体培养即可。也可以完全融解后使用,但随着冻融次数的增加,细菌的活力会逐渐下降。

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