拟多形假丝酵母的保存方法与微生物菌种培养!
小杨 / 2023-03-24 09:43:05


拟多形假丝酵母,属能形成假菌丝、不产生子囊孢子的酵母。不少的假丝酵母能利用正烷烃为碳源进行石油发酵脱蜡,并产生有价值的产品。主要用于教学,研究。

一、菌种简介
平台编号:Bio-79739
规格:Frozen
拉丁属名:Candida Parapolymorpha
菌株名称:拟多形假丝酵母
用途:ATCC原装进口
注意事项:仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用(产品信息以出库为准)

二、详细描述
Candida parapolymorpha Suh et Zhou 拉丁名
(ATCC? 26012?) 菌株编号 
Strain Designations 菌株别名 : DL-1 [NRRL Y-7560] /
Product Format 提供形式: frozen
Deposited As Hansenula polymorpha de Morais et Maia, teleomorph
Strain Designations菌株别名  DL-1 [NRRL Y-7560]
Application用途  produces 2-butanone alcohol dehydrogenase
produces formaldehyde produces hydrogen peroxide
produces isopropanol dehydrogenase (NADP) secondary
alcohol dehydrogenase
produces methyl ketones
transformation hos
t utilizes methanol
reduces 4-chloro-1-(4-fluorophenyl)butan-1-one
transformation host for expression of hirudin gene
Biosafety Level 生物安全等级 1
Biosafety classification is based on U.S. Public Health Service Guidelines, it is the responsibility of the customer to ensure that their facilities comply with biosafety regulations for their own country. Product Format frozen
Storage Conditions 保藏方法 Frozen(冷冻物): -80℃ or colder
Freeze-Dried(冻干物): 2℃ to 8℃
Live Culture: See Propagation Section
Type Strain 模式菌株 yes
Disclosure 说明 This material is cited in a US or other Patent and may not be used to infringe the claims. Depending on the wishes of the Depositor, ATCC may be required to inform the Patent Depositor of the party to which the material was furnished. This material may not have been produced or characterized by ATCC.
Preceptrol? no
Genome Sequenced Strain Yes
Comments  注释 Mitochondrial genome sequenced strain. Ref Genome sequencing strain (the Joint Genome Institute at the Department of Energy, USA; Korea Research Institute of Bioscience and Biotechnology, S. Korea; Centre 'Bioengineering' RAS, Russia).
Medium ATCC? Medium 28: Emmons' modification of Sabouraud's agar
ATCC? Medium 200: YM agar or YM broth
ATCC? Medium 1245: YEPD
Growth Conditions 生长条件
Temperature 培养温度 : 24℃ to 26℃
Atmosphere 需氧情况: Typical aerobic

三、微生物培养方法
1、平板划线分离法:把混杂在一起的微生物或同一微生物群体中的不同细胞用接种环圈在平板培养基表面,通过分区划线稀释而得到较多独立分布的单个细胞,经培养后生长繁殖成单菌落。
2、稀释涂布平板法将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养,在稀释度足够高的菌液里,聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞,从而能在培养基表面形成单个菌落。
上述两种方法虽然都可以实现观察菌落特征的目的,但平板划线分离法不能对菌落计数,而稀释涂布平板法培养过程复杂,对平板的要求比较高,可参照以下步骤:
a、制备平板培养基将氯化钠蔗糖琼脂培养基加热溶化并冷却至65℃,向氯化钠蔗糖琼脂培养基中加入克林霉素溶液3~5ml并混合均匀,然后取20ml混合均匀的培养基溶液倒入培养皿,轻轻摇动培养皿,使培养基溶液均匀分布在培养皿底部,待培养基溶液凝固后即得平板培养基。
b、制备活性污泥混合液称取活性污泥土样15g,放入盛100ml无菌水并带有玻璃珠的三角烧瓶中,振摇15~20min混合均匀,用一支1ml无菌吸管从中吸取1ml土壤悬液加入盛有9ml无菌水的大试管中充分混匀,制成活性污泥混合液。
c、培养基涂布从活性污泥混合液中吸取0.2ml,滴在平板培养基表面的中央位置,用无菌玻璃涂棒将活性污泥混合液沿同心圆方向轻轻地向外扩展,使之分布均匀。

四、保存方法
1、传代保存法:培养基的浓度不宜过高,营养成分不宜过于丰富,尤其是碳水化合物的浓度应在可能的范围内尽量降低。培养温度通常以稍低于最适生长温度为好。若为产酸菌种,则应在培养基中添加少量碳酸钙。
2、液体石蜡覆盖保存法:该法较前一种方法保存菌种的时间更长,适用于霉菌、酵母菌、放线菌及需氧细菌等的保存。
3、悬液保存法:
①蒸馏水保存法:适用于霉菌、酵母菌及绝大部分放线菌,将其菌体悬浮于蒸馏水中即可在室温下保存数年。本法应注意避免水分的蒸发。
②糖液保存法:适用于酵母菌,如将其菌体悬浮于10%的蔗糖溶液中,然后于冷暗处保存,可长达10年。除此之外,也可使用缓冲液或食盐水等进行保存。
4、载体保存法:①土壤保存法;②砂土保存法;③硅胶保存法;④磁珠保存法;⑤麸皮保存法;⑥纸片(滤纸)保存法。
5、常用的冷冻保存法:
①低温冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃):低温冷冻保存时使用螺旋口试管较为方便,也可在棉塞试管外包裹塑料薄膜。保存时菌液加量不宜过多,有些可添加保护剂。此外,也可用φ5mm的玻璃珠来吸附菌液,然后把玻璃珠置于塑料容器内,再放入低温冰箱内进行保存的。
②干冰保存法(-70℃左右):即将菌种管插入干冰内,再置于冰箱内进行冷冻保存。
③液氮保存法(-196℃):是适用范围最广的微生物保存法。

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