一、产品信息
平台编号：Bio-53892
规格：1×10⁶Cells/T25培养瓶
细胞信息：HMSC
细胞名称：人骨髓血间充质干细胞
骨髓来源：人MSC细胞
描述：正常的骨髓来源的人间充质干细胞，每支细胞量1×106，具备分化成脂肪、成骨和软骨的能力。CD29、CD44、CD73、CD90、CD105、CD166表达阳性；CD14、CD31、CD34、CD45表达阴性。
动物种别：人
性别：女
组织来源：骨髓
形态：梭形、纺锤形和多角形
培养基和添加剂：人MSC完全培养液配方（500ml）： 1. Mesenchymal Stem Cell Basal Medium for Adipose, Umbilical and Bone Marrow-derived MSCs (ATCC PCS-500-030TM) 485ml 2. Bone Marrow-Mesenchymal Stem Cell Growth Kit根据ATCC PCS-500-030TM配制）（配方见下）： ES级FBS（biochrom S4115） 35 ml rhFGF basic（R&D 233-FB-025） 终浓度125 pg/mL rhIGF-1（R&D 291-G1-200） 终浓度15 ng/mL L-Alanyl-L-Glutamine（SIGMA A8185-5G） 终浓度2.4 mM
气相：空气，95%；二氧化碳，5%。
温度：37摄氏度。
供应限制：仅供研究之用。
用途：研究
注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用（产品信息以出库为准）
二、细胞简介
骨髓间充质干细胞是干细胞家族的重要成员，来源于发育早期的中胚层和外胚层。骨髓间充质干细胞最初在骨髓中发现，因其具有多向分化潜能、造血支持和促进干细胞植入、免疫调控和自我复制等特点而日益受到人们的关注。如间充质干细胞在体内或体外特定的诱导条件下，可分化为脂肪、骨、软骨、肌肉、肌腱、韧带、神经、 肝、心肌、内皮等多种组织细胞，连续传代培养和冷冻保存后仍具有多向分化潜能，可作为理想的种子细胞用于衰老和病变引起的组织器官损伤修复。
本公司生产的永生化人骨髓间充质干细胞采用密度梯度离心法和 SV40T 慢病毒制备而来，细胞总量约为 1×106/T25 方瓶以上；不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
三、收到细胞后的处理方法
您收到细胞后，请按照以下方法进行操作：取出 T25 方瓶，75%酒精擦拭培养瓶，拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 细胞培养箱中静置2-3 小时，以稳定细胞状态，然后打开瓶子回收瓶子中培养液作为后续培养此细胞的完全培养液，最后按照后面细胞传代步骤进行细胞传代培养。
四、细胞培养步骤
1、细胞传代：
1）细胞生长至覆盖培养瓶的 90%面积时，弃 T25 方瓶中的培养液，用 PBS 清洗细胞 3 次；
2）添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 2ml 至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化，再轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至 15ml 离心管中，1200rpm/min，离心 5min；
3）弃上清，沉淀细胞用 12ml 完全培养基重悬，然后按 1:2 比例进行分瓶传代，最后放入37℃，5%CO2 细胞培养箱中培养；
4）待细胞完全贴壁后，观察培养结果，之后进行换液培养或传代。
2、细胞冻存：
1）细胞生长至覆盖培养瓶的 90%面积时，弃 T25 方瓶中的培养液，用 PBS 清洗细胞 3 次；
2）添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 2ml 至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后轻轻吹打细胞使之脱落，再加入完全培养液终止消化，然后将悬液转移至 15ml 离心管中，1200rpm/min，离心 5min；
3）用适当量的冻存液（FBS：DMSO=9:1）重悬细胞，并放置于冻存管中；
4）先将细胞冻存管放置于-20℃ 1h，然后将其移入-80℃过夜，24h 后转入液氮中进行长期保存。
3、细胞复苏：
1）从液氮中取出细胞冻存管（注意：佩戴防爆管面具），快速将其置入 37℃水浴中解冻，直至冻存管中无结晶，然后用 75%的酒精擦拭冻存管外壁；
2）将冻存管中的细胞转移至含 5ml 完全培养液无菌离心管中，1200rpm 离心 5min，然后加入 5ml 完全培养液混匀细胞，将细胞悬液转移至 T25 培养瓶中，放置于 37℃，5%CO2 细胞培养箱中培养；
3）第二天，换用新鲜完全培养基继续培养。
五、注意事项
1、培养基于 4℃条件下可保存 3-6 个月；
2、在细胞培养过程中，请注意保持无菌操作；
3、该细胞只可用于科研；
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