一、产品信息
平台编号：Bio-131403
规格：1×10⁶Cells/T25培养瓶
细胞信息：TRAMP-C1
细胞名称：小鼠前列腺癌细胞TRAMP-C1
产品规格：T25培养瓶x1；1.5ml冻存管x2
细胞数量：1x10^6；1x10^6
保存温度：37℃；-198℃
运输方式：常温保温运输；干冰运输
安全等级：1
用途限制：仅供科研3类
培养体系：90%DMEM+10%FBS+1%三抗
培养温度：37℃
二氧化碳浓度：5%
简介：小鼠前列腺癌细胞TRAMP-C1取自雄性C57BL/6-TgN(TRAMP)8247Ng小鼠。该细胞源于ATCC
注释：倍增时间36h
用途：研究
注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用（产品信息以出库为准）
二、细胞简介
小鼠前列腺癌细胞分离自小鼠源前列腺癌的上皮细胞样贴壁细胞，主要用于TRAMP-C1小鼠前列腺癌细胞的体外研究。TRAMP-C1小鼠前列腺癌细胞支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性。培养条件：DMEM+10%FBS，37℃，5%CO2，冻存条件：90%FBS+10%DMSO。
三、细胞处理
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，离心管加入4mL培养基混合均匀。在800-1000RPM条件下离心4-5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入T25培养瓶中培养，补加培养基至6ml。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%，即可进行传代培养。注：第一次传代推荐传代比例为1:2，以后传代比例可根据客户需要自己决定。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。
下面T25瓶为类；
1、细胞冻存时，取上清，可使用血球计数板计数。
2、4min，1000rpm离心去掉上清。加1ml血清重悬细胞，根据细胞数量加入血清和DMSO，轻轻混匀，DMSO终浓度为10%，细胞密度1-2xE6/ml，每支冻存管冻存1ml细胞悬液，注意冻存管做好标识。
3、将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
四、细胞的运输和保存
视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满完全培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
五、注意事项
1、接收到,肉眼观察细胞培养基颜色,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张)。
2、用75%的酒精消毒(建议配置75%的酒精的水是灭菌过的)。
3、严格无菌操作,打开细胞培养瓶。
4、将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出(严禁直接倾倒),放入另一无菌容器中(建议换新的培养基培养细胞)。
5、用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆,轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落,加入终止液终止。
6、1000rpm,5min离心,重悬细胞。
7、换新的细胞培养瓶,37℃,5%CO2培养。
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