Ana-1(小鼠巨噬细胞)的使用与处理及注意事项!
小杨 / 2022-11-08 09:45:19


巨噬细胞是从循环的骨髓来源的单核细胞中分化出来的。在骨髓和之后的血液和组织中,巨噬细胞经历了一个成熟级联的过程,最终转变为形态和功能成熟的组织巨噬细胞。

一、细胞简介
平台编号:Bio-72965
规格:1×10⁶Cells/T25培养瓶
细胞信息:Ana-1
细胞名称:Ana-1(小鼠巨噬细胞) 
种属:小鼠 
组织来源:巨噬细胞 
生长特性:贴壁/悬浮 
细胞形态:巨噬细胞样 
背景描述:生长培养基 RPMI-1640+10% FB+1% P/S
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5% 温度:37℃
运输保存:采用干冰保存运输
细胞用途:仅供科研使用
用途:(种属鉴定正确)
注意事项:仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用(产品信息以出库为准)

二、细胞特性
1)组织来源于实验动物的正常骨髓组织。
2)细胞鉴定:CD68和MAC387免疫荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
5)细胞生长方式:圆形,不规则细胞,贴壁培养。

三、细胞的使用方法
1) 本产品仅能用于科研
2) 本产品未通过直接用于活体动物和人的审核
3) 本产品未通过用于活体诊断的审核

四、细胞的处理方法
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,先要消化处理并进行细胞计数。消化方法按照细胞传代方法的1-3步骤进行,*的重悬液使用血清。悬浮细胞直接计数后离心,用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中。

五、注意事项
1、收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象发生请及时和我们联系。
2、仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。
3、用75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养过夜,隔天再取出观察。此时多数细胞均会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常,请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活力,请拍下照片及时和我们联系。
4、请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞传代时可以一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。
5、所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。

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