为何培养细胞生长减慢,任何改进!(转沈阳农业大学购买者心得)
我是沈阳农业大学的,4月在中国微生物菌种查询网订购了一支293T 人胚肾细胞 ,他们实验室老师1周左右复苏好然后邮寄过来的,我这边收到细胞后就倒置在显微镜下观察,当时的新报状态还行,由于当时细胞还没有长慢,这边就是换了我们自己配置的培养液继续培养,但是后续观察细胞生长的有点慢,(因实验经验不足就电话咨询培养老师 老师一听说我们这边更换了不同培养液有关)于是才了解,只是感概初学者一定要先了解一下细胞生长慢的原因,对症下药。
1,由于更换不同培养液或血清,
2,培养液中一些细胞生长必需成分
3,如谷氨酰胺或生长因子耗尽或缺,乏或已被破坏。
4,培养物中有少量细菌或真菌污染
5,试剂保存不当
我们应该如何处理:
1,比较新培养液与原培养液成分,比较新血清与旧血清支持细胞生长实验。
2,增加起始培养细胞浓度。让细胞逐渐适应新培养液。
3,换入新鲜配制培养液。
4,补加谷氨酰胺或生长因子。
5,用无抗生素培养液培养,如发现污染,丢弃培养物。或用抗生素除菌。
6,血清需保存在-5℃ 到-20℃。培养液需在 2-8℃避光保存。含血清完全培养液在 2-8℃保存,并在 2 周内用完。