产碱假单胞菌的培养条件与实验内容及打管说明!
小杨 / 2022-06-29 09:47:45


产碱假单胞菌,微弱水解明胶。卵黄反应阴性。不需要有机生长因素。营养谱有非常的局限性,在已试的146个有机化合物中,只有23个能作为唯一的碳源。可利用的基物有:柠檬酸盐、DL-精氨酸盐、β-丙氨酸和精胺。糖类包括葡萄糖和果糖、葡萄酸盐、β羟基丁酸盐、庚二酸盐、D-苹果酸盐、乙醇、甘油、甘露醇、间-和对-羟基苯甲酸、D-丙氮酸L-丝氨酸、L-天冬氨酸盐、L-苯丙氨酸、腐胺和甜菜碱等都不利用。

一、菌种简介
平台编号:Bio-58976
提供形式:冻干物
拉丁属名:Pseudomonas Alcaligenes
中文名称:产碱假单胞菌
属名:Pseudomonas
种名加词:alcaligenes
来源历史:←北京工商大学化工学院(10243)
收藏时间:2006.12.23
原始编号:D70
资源归类编码:15131134101
模式菌株:非模式菌株
主要用途:研究
具体用途:用于污水处理的研究
特征特性:G-,细菌杆状,极生单鞭毛运动。水解明胶,可利用柠檬酸盐、葡萄糖和果糖、乙醇、甘油、甘露醇,不能反硝化,专性好氧。    
生物危害程度:四类
致病对象:无
分离基物:驯化活性污泥
采集地:北京工商大学
培养基:蛋白胨 5.0g,牛肉浸取物 3.0g,NaCl 5.0g,琼脂 15.0g,蒸馏水 1.0L,pH7.0。[注] 培养芽孢杆菌时加入5mg MnSO4·H2O,则有利于产生芽孢。
培养温度:35℃
资源保藏类型:培养物
保存方法:真空冷冻干燥法
实物状态:有实物
共享方式:公益性共享;资源纯交易性共享;合作研究共享;资源交换性共享
用途:研究;用于污水处理的研究
注意事项:仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用(产品信息以出库为准)
储存条件:冻干菌种和试管斜面请置于 2-8℃冷藏。西林瓶菌种请置于-20℃冷冻。 

二、培养条件
1、培养基编号:CM0002
2、培养基成分:蛋白胨 5.0g,牛肉浸取物 3.0g,NaCl 5.0g,琼脂 15.0g,蒸馏水 1.0L,pH7.0。[注] 培养芽孢杆菌时加入 5mg MnSO4·H2O,则有利于产生芽孢。
3、需氧类型:好氧
4、培养温度:35℃

三、实验内容
1、称量→溶化→调pH→过滤→分装→加塞→包扎→灭菌→无菌检查 
2、干热灭菌:装入待灭菌物品→升温→恒温→降温→开箱取物 
3、高压蒸汽灭菌:加水→装物品→加盖→加热→排冷空气→加压→恒压→降压回零→排汽→取物→无菌检查 
4、过滤除菌:组装灭菌→连接→压滤→无菌检查→清洗灭菌

四、注意事项
1、菌种常规培养时间:细菌 1-2 天,酵母 3 天,霉菌 5-7 天,大型真菌 7-10 天。
2、试管斜面菌种请尽快转接,不建议长期存放。
3、初次使用时请按照本说明书推荐条件进行复活培养,如使用其它类型培养基或培养条件造成菌种不活等损失,我单位不负责任。
4、使用者应保证菌种的安全存储和操作,带菌废弃物应高压灭菌处理后丢弃。
5、与菌种相关的其它信息请参阅微生物菌种查询网网站(www.biobw.org)。

五、冻干管打管说明书
1、安瓿瓶开封:用浸过 75%酒精的脱脂棉檫试冻干管表面进行消毒,将管顶端于酒精灯外焰上均匀加热;立即滴 2-3 滴无菌水于加热部位,使管壁破裂;再用镊子或其他适宜工具敲下破裂处。
2、菌株恢复培养:用无菌吸管吸取 0.5ml 左右液体培养基(固体培养基去掉琼脂即可)于冻干管中将冻干菌粉全部溶解。将溶解后的菌悬液转移至盛有 4~5mL 液体培养基的试管中混匀,并取 100μL 转接到固体培养基上。将液体试管和斜面试管于推荐条件下静置培养。
3、注意事项:菌种活化前,请将安瓿管保存在 2-8℃的环境下,某些菌种经过冷冻干燥保存后处于休眠状态,延迟期较长,需要转接至 2-3 代恢复活力。
4、复苏后的菌种在传 1-2 代后使用。
5、暂不启开的安瓿管应于 4℃中保藏(特殊除外)。
6、冻干管打开后需一次用完,不能留存。
7、打管操作需由专业微生物技术人员在相应的防护设备中进行,生物危害程度为三类的菌种应在生物安全柜中操作,打管时冻干管应远离面部,保护眼睛。
8、打管操作应在烧杯或托盘上方进行,用完冻干管应灭菌处理后丢弃。

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