帚状曲霉的培养方法与注意事项及打管说明!
小杨 / 2022-04-28 09:21:36


帚状曲霉,菌落在查氏琼脂上生长极为局限,25℃培养14天肉眼只能见到一点灰白色的菌丝体及很少的正在形成的分生孢子结构,3周后,直径仅2-3mm。菌落在麦芽汁琼脂上生长极局限, 25℃培养14天才开始形成很少的分生孢子结构,白色;无渗出液;无气味;菌落反面无色。

一、菌种简介
平台编号:Bio-68032
规格:冻干物
拉丁属名:Aspergillus Penicillioides
菌株名称:帚状曲霉
其他编号:CGMCC 3.7887
培养基编号:15
培养温度:25℃
培养时间:5-7 天
分离源:饲料
培养基编号:15
名称:15. Czapek′s Agar(察氏琼脂)
可用于培养菌种:适用范围:红霉素链霉菌、洋葱曲霉、金头曲霉、泡盛曲霉、泡盛曲霉烟色变种、亮白曲霉、炭黑曲霉、鹿皮色曲。
备注:Sucrose (蔗糖) 30g NaNO3 3g MgSO4.7H2O 0.5g KCl 0.5gFeSO4.7H2O 0.01g K2HPO4 1gAgar (琼脂) 13g Distilled water (蒸馏水) 1000mlpH 7.2
用途:研究
注意事项:仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用(产品信息以出库为准)

二、形态特征
帚状曲霉,菌落在查氏琼脂上生长极为局限,25℃培养14天肉眼只能见到一点灰白色的菌丝体及很少的正在形成的分生孢子结构,3周后,直径仅2-3mm。
菌落在查氏酵母膏琼脂上生长很局限, 25℃培养 14天,直径1.5-2mm,才开始形成少量的分生孢子头,白色;无渗出液;无气味;菌落反面无色。
帚状曲霉,菌落在20%蔗糖查氏琼脂上,生长也很局限, 25℃培养14天,直径15-20mm,中心稍凸起,其他部分平坦;质地丝绒状;具大量的分生孢子结构,暗绿色,近于叶绿色( Leaf Green,R. XLI) 或常春藤绿( Ivy Green,R. XXX) ,边缘白色;无渗出液;有轻霉味;菌落反面呈不同程度的微黄到暗绿色。分生孢子头幼时呈辐射状,成熟后有时呈疏松的圆柱状,可达200μm或更长;分生孢子梗发生于基质,少数发生于气生菌丝,孢梗茎130-250μm×4一8μ m,壁平滑;顶囊烧瓶形,少数顶囊近棒形,直径 9.5-20μm,1/2的表面可育;产孢结构单层;瓶梗7- 9.5(-ll)μm×2-3.2μm;分生孢子成熟时球形或近球形,很少数呈椭圆形,3- 3.5(- 4..5)μm, 壁粗糙。
帚状曲霉,菌落在麦芽汁琼脂上生长极局限,25℃培养14天才开始形成很少的分生孢子结构,白色;无渗出液;无气味;菌落反面无色。紫金砂,药材( 玉竹、人参)。37℃不生长。

三、培养基
综合马铃薯培养基(PDA)
20%马铃薯汁 1L 葡萄糖 20g MgSO4.7H2O 1.5g KH2PO4 3g
Vitanib B1 (硫胺素) Trace 微量约 8mg Agar (琼脂) 20g pH 自然
20%马铃薯汁配制方法:马铃薯洗净去皮,取 200 克切成小块 , 加水 1000 毫升煮沸 20 分钟后滤去马铃薯块,将滤液补足 1000ml。 

四、保藏条件
斜面菌种和冻干菌种应在 2-8°C 保存。 

五、注意事项
1)冻干首次活化,干粉要全部用完,不能预留,用 0.1-0.2ml 的培养液或无菌水溶解,接种在 2 支斜面上,因冻干粉处于休眠状态,请勿接种多支斜面或平板,以避免因接种量不足而导致复苏不成功;如有不明白之处,请务必先咨询我单位技术人员,避免不必要的损失;
2)微生物菌种应保藏于低温、清洁干燥的地方,室温放置时间过长会导致菌种衰退;
3)菌种操作应在无菌条件下进行;转种完毕,应经灭菌再做丢弃处理;
4)应根据菌种状况及时转接,冻干菌种保藏时间通常为 2-25 年;
5)菌种使用过程中如出现杂菌污染或菌种生产性能下降,应及时和微生物菌种查询网联系。

六、冻干管打管说明书
1、安瓿瓶开封:用浸过 75%酒精的脱脂棉擦净安瓿管,用火焰加热其顶端,滴少量(2-3滴)无菌水至加热顶端使之破裂,用锉刀或者镊子敲下已破裂的安瓿管顶端。双层冻干瓶的话用镊子去除小管内的脱脂棉,将小管开口处在火焰上过一遍,并保持在火焰旁操作。
2、注意事项:菌种活化前,请将安瓿管保存在 4-10℃的环境下,某些菌种经过冷冻干燥保存后处于休眠状态,延迟期较长,需要连续两次继代培养才能正常生长。
3、复苏后的菌种在传 1-2 代后使用。
4、暂不启开的安瓿管应于 4℃中保藏(特殊除外)。
5、冻干管打开后需一次用完,不能留存。
6、打管操作需由专业微生物技术人员在相应的防护设备中进行,生物危害程度为三类的菌种应在生物安全柜中操作,打管时冻干管应远离面部,保护眼睛。

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