IEC-6 ， 大鼠小肠隐窝上皮细胞
微生物菌种查询网 / 2015-03-24 08:02:00
细胞系描述
细胞库编号：KCB200720YJ
种属：大鼠
组织来源：小肠
生长特性：贴壁生长
形态特征：上皮细胞样
细胞特性：该细胞表达肠上皮特有抗原。20代以前能保持恒定的生长速度和细胞形态，此后细胞生长速度会减慢，细胞形态也会发生改变。氢化可的松可抑制该细胞的生长。
培养条件：完全培养基： DMEM95%(内含2mM Glutamin)+5%胎牛血清+100ug/ml insulin（细胞生长速度变慢后，血清浓度可加到10%）。
血清我们推荐用:
GIBCOFBS-10099-141或HYCLONEFBS-SH30084.03。用质量不好的血清不能保证此细胞会有好的生长状态.
培养条件：37 ℃，CO2：5%
传代方法：
收到细胞后，在倒置显微镜下观察整个细胞生长情况：
如果细胞未长满，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内，严格无菌操作，打开细胞培养瓶，吸出培养液，换 10ml新鲜培养液后继续培养。
如果细胞已长满（达80-90%），即可进行传代培养。具体步骤如下：
1. 弃去培养液，用不含钙、镁离子的PBS洗1-2次。
2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，倒转放于37℃培养箱1-3分钟预热，然后将培养瓶翻过来让胰酶与细胞面接触大约10-30秒后，在倒置显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量完全培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶（25cm2）补加完全培养基，轻轻打匀后吸出一半，分到新的培养瓶中。如果没有特别说明，收到细胞后的第一次传代一般是一传二。
注：1、观察细胞最好在低倍镜（4或5X物镜)下进行，否则不能准确判断细胞的传代密度。看细胞的形态请在10X或20X物镜下。
2、瓶中运输培养基不能重复再用,请换用加双抗的新培养基，细胞冻存后,培养基中可不加任何抗生素。
3、有些细胞贴壁不牢，如发现贴壁细胞有脱落，可离心吹打后接种到新瓶内。
4、收到细胞后，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请及时与我们联系。
冻存方法：
冻存液：90%完全培养液，10%DMSO（细胞培养级），现用现配。
储 存：
液氮。
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