一、菌种简介
平台编号：bio-80013
规格：freeze-dried
拉丁属名：Desulfovibrio desulfuricans subsp. desulfuricans
菌种名称：脱硫脱硫弧菌亚种
注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用
二、产品概述
Desulfovibrio desulfuricans subsp. desulfuricans (Beijerinck) Kluyver and van Niel 拉丁名
(ATCC 27774 ) 统一编号
Strain Designations 菌种别名 MB Application Produces iron-sulfur protein Produces restriction endonuclease DdsI Biotechnology
Isolation 分离基物 Rumen of sheep
Biosafety Level 生物安全等级 1
Biosafety classification is based on U.S. Public Health Service Guidelines, it is the responsibility of the customer to ensure that their facilities comply with biosafety regulations for their own country.
Product Format 提供形式 freeze-dried
Storage Conditions 保藏条件
Frozen（冷冻物）: -80℃ or colder
Freeze-Dried（冻干物）: 2℃ to 8℃
Live Culture: See Propagation Section
Preceptrol? no
Genome Sequenced Strain Desulfovibrio desulfuricans subsp. desulfuricans str. ATCC 27774, complete genome.
Type Strain 模式菌种 no
Comments 注释 Capable of utilizing nitrate as well as sulfate during the anaerobic fermentation of lactate in energy metabolism Genome sequenced strain
Medium 培养基 ATCC Medium 1249: Modified Baar's medium for sulfate reducers
ATCC Medium 260: Trypticase soy agar/broth with defibrinated sheep blood
ATCC Medium 2755: Desulfovibrio Medium
Growth Conditions 生长条件
Temperature 培养温度: 37℃
Atmosphere 需氧情况: Anaerobic gas mixture, 80% N2-20% CO2
Name of Depositor 寄存人 MP Bryant
Isolation 分离基 Rumen of sheep
三、脱硫弧菌脱硫亚种培养注意事项
1、取细胞的过程中注意带好防冻手套，护目镜。此项尤为重要，细胞冻存管可能漏入液氮，解冻时冻存管中的气温急剧上升，可导致爆炸。
2、冻存液的问题：冻存液的配置已是常识，在这里不作详述，但二甲基亚砜（DMSO）对细胞不是完全无毒副作用，在常温下，二甲基亚砜对细胞的毒副作 较大，因此，必须在1-2min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢，会造成细胞的损伤，二甲基亚砜（DMSO）选择进口产品。
3、离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较高，注意加入少量培养液可稀释其浓度，以减少对细胞的损伤。
4、离心问题：目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养，第二天换液。因为离心的目的是两个，去除 DMSO，去除死细胞，这个是标准流程，但对一般人来说，把握不好离心转速和时间，转的不够活细胞沉底的少，细胞就全被扔掉了，转过了活细胞会受压过大， 死亡。此外在操作过程中容易污染，所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜（DMSO），DMSO对细胞有一定的毒副作用，所以须将离心后的液 体前倒净，且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏，结果无有异常。
5、细胞贴壁少的问题：教科书中说明冻存细胞解冻时1ml细胞液要加10ml－15m培养液，而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。
6、复苏细胞分装的问题：试验中我的经验总结为复苏1管细胞一般可分装到1-2只培养瓶中，分装过多，细胞浓度过低，不利于细胞的贴壁。
7、加培养基的量放入问题：这个量的多少的把握主要涉及到的问题是DMSO的浓度，从如果你加培养基的太少，那么DMSO的浓度就会比较大，就会影响 细胞生长，从以前的资料来看，DMSO的浓度在小于0.5%的时候对一般细胞没有什么影响，还有一个说法是1％。所以如果你的冻存液的浓度是 10％DMSO的话那么加10ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。
四、脱硫弧菌脱硫亚种低温保存方法
①简单保存法，将琼脂斜面孢子培养物、菌丝悬浮液以及由麸皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培养物置于4℃冰箱保存,保存时间不超过1～2个月，若将谷物原料制备的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蜡,以隔绝外界空气和水汽,保持时间可达3～4个月；
②液氮超低温保存法，将生长稳定期的细胞悬浮在10%甘油或其他低冰点液体中，密封于安瓿管内，然后控制冷却速度，使安瓿管温度逐步下降至 -35℃时，即可置于-150～-196℃的液氮罐中保存。大多数微生物如病毒、噬菌体、多种细菌、放线菌、酵母和原虫、特别是一些用冷冻干燥法有困难的微生物，都可用此法长期保存。