
短双歧杆菌 Bifidobacterium是1899年由法国学者Tissier从母乳营养儿的粪便中分离出的一种厌氧的革兰氏阳性杆菌,末端常常分叉,故名双歧杆菌。
一、菌种简介
平台编号:bio-52716
规格:冻干物
拉丁属名:Bifidobacterium breve Reuter
中文学名:短双歧杆菌
分布区域:温血脊椎动物的肠道、昆虫和垃圾
其它编号:AS1.2213、JCM1192、ATCC15700
培养基编号:61
培养温度:37℃厌氧环境下培养
培养时间:48 小时
用途:模式菌株
注意事项:仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用
二、培养基
双歧杆菌培养基
大豆蛋白胨 5.0 克 胰胨 5.0 克 酵母提取物 10.0 克 葡萄糖 10.0 克
盐溶液 40.0ml L-半胱氨酸 0.5 克 0.1%刃天青 1.0ml 琼脂 15.0 克
蒸馏水 1.0 升 pH7.0
其中盐溶液的配制:
氯化钙 0.2 克 七水硫酸镁 0.48 克 磷酸氢二钾 1.0 克 磷酸二氢钾 1.0 克
碳酸氢钠 10.0 克 氯化钠 2.0 克 蒸馏水 1.0 克 pH 6.5
三、保藏条件
斜面菌种和冻干菌种应在 2-8°C 保存,活化好的菌种要放厌氧环境下保存。
四、认识过程
由于近二十年来微生态学的崛起和医学革命的进展,使双歧杆菌研究的重要性越来越被认识。由于双歧杆菌制品在世界范围得以广泛应用,广大群众已认识到其重要性。特别是能够为婴幼儿的肠道健康提供独特的保护作用,有效地减少婴幼儿肠道感染的发病率。
双歧杆菌的主要作用与广泛应用,也为双歧杆菌的研究奠定了发展的基础。经过众多专家学者的不断探索实验,已确认双歧杆菌是肠内最有益的菌群,双歧杆菌数量的减少乃至消失是“不健康”状态的标志,双歧杆菌是人体健康的晴雨表。
微生态学研究发健康人体的消化道中的细菌数有100种,其数量达100兆以上。人体肠道内细菌群随着人的年龄增加变化显著。婴儿出生后3~4天肠道内即出现双歧杆菌,婴幼儿双歧杆菌数量占约肠内细菌总量的25%;随着年龄的增大,双歧杆菌逐渐减少甚至消失,65岁以上的老人,双歧杆菌数量则减少到仅占7.9%,而产气荚梭菌、大肠杆菌等腐败细菌大量增加;到了老年肠道内充满腐败细菌,双歧杆菌几乎消失。
腐败细菌在肠道中分解食物成分,产生氨气、胺类、硫化氨、粪臭素、吲哚、酚类以及亚硝胺等有毒物质,人体长期吸收这些毒素,会加速衰老,诱发癌症,引起动脉硬化、肝脏障碍等疾病。
提高双歧杆菌在体内的数量有两种方法:“活菌体外补养”和“活菌体内增殖”。“活菌体外补养”就是口服有一定数量双歧杆菌的活菌制。
五、注意事项
1)冻干首次活化,干粉要全部用完,不能保留,用 0.1-0.2ml 的培养液或者无菌水溶解,接种在 1-2 个平板上,因冻干菌种处于休眠状态,请勿接种多个平板,以免因接种量不足导致复苏不成功。如有不明白之处,请务必先咨询我单位技术人员,避免不必要的损失;
2)微生物菌种应保藏于低温、清洁干燥的地方,室温放置时间过长会导致菌种衰退;
3)菌种操作应在无菌条件下进行;转种完毕,应经灭菌再做丢弃处理;
4)斜面菌种保藏时间通常为 6 个月,应根据菌种状况及时转接;
5)菌种使用过程中如出现杂菌污染或菌种生产性能下降,应及时和中国微生物菌种查询网联系。
六、西林瓶打管说明书
1、开封:75%酒精棉擦拭西林瓶外部,在安全柜内使用尖嘴钳去除塑料盖及铝盖, 注意不要同时打开胶塞。缓慢开启胶塞,用 75%酒精棉消毒瓶口部分,使用无菌吸管注入 0.2ml适宜的液体培养基复溶冻干粉末。
2、注意事项:菌种活化前,请将安瓿管保存在 4-10℃的环境下,某些菌种经过冷冻干燥并抽真空保存的,开启后必须一次使用完,不能留菌粉下次使用;另外,安瓿管里大部分是用牛奶作为保护剂,里面菌体为少数,复苏时要全部菌悬液接在新鲜培养基上,否则可能造成复苏不成功;
3、冻干菌种经过冷冻干燥保存后处于休眠状态,有时延滞期较长,如在说明书建议的培养时间还未长起来,请继续在相应的环境下多培养 24 小时或者更长时间,直至菌种培养完成;有的菌种需要连续两次继代培养才能正常生长,一般来说菌种稳定后才能用于您的后续实验。
4、暂不启开的安瓿管应于 4℃中保藏(特殊除外)。冻干管打开后需一次用完,不能留存。
5、打管操作需由专业微生物技术人员在相应的防护设备中进行,生物危害程度为三类的菌种应在生物安全柜中操作,打管时冻干管应远离面部,保护眼睛。