AS3.38黑根霉的培养条件与注意事项!
小杨 / 2020-10-12 08:57:41


黑根霉(Rhizopus nigricans)是真菌的一种,属于真菌门接合菌亚门的根霉属,菌丝无隔,常利用它的糖化作用,比如甜酒曲中的主要菌种就是黑根霉。

一、菌种简介
平台编号:bio-52308
规格:冻干物
拉丁属名:Rhizopus nigricans Ehrenberg
菌株名称:黑根霉
其它编号:AS3.38
培养基编号:14,17
培养温度:25-28℃
培养时间:5-7 天
属  性:真菌的一种 
用途:研究,发酵工业上常使用的微生物菌种
注意事项:仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

二、形态特征
黑根霉(Rhizopus nigricans)是真菌的一种,属于真菌门接合菌亚门的根霉属,菌丝无隔,常利用它的糖化作用,比如甜酒曲中的主要菌种就是黑根霉。
匐枝根霉亦称黑根霉,也叫面包霉,分布广泛,常寄生在面包和日常食品上,或混杂于培养基中,瓜果蔬菜等在运输和贮藏中的腐烂及甘薯的软腐都与其有关,菌丝体分泌出果胶酶,分解寄主的细胞壁,感染部位很快会腐烂形成黑斑。黑根霉(ATCC6227b)是发酵工业上常使用的微生物菌种。黑根霉的最适生长温度约为28℃,超过32℃不再生长。
黑根霉是一种腐生于面包、馒头和米饭上的真菌。向内部生长伸入基质的菌丝,叫做“营养菌丝”;在基质外部向外生长的菌丝,叫做“直立菌丝”。无性繁殖时,在假根处向上产生直立的孢子囊梗,顶端膨大成放射状的孢子囊,囊中产生孢子,成熟时呈黑色。孢子一般在空气中飘散,落在适宜的基质上萌发形成新的菌丝体。

三、培养基
综合马铃薯培养基(PDA)
20%马铃薯汁 1L 葡萄糖 20g MgSO4.7H2O 1.5g KH2PO4 3g
Vitanib B1 (硫胺素) Trace 微量约 8mg Agar (琼脂) 20g pH 自然
20%马铃薯汁配制方法:马铃薯洗净去皮,取 200 克切成小块 , 加水 1000 毫升煮沸 20 分钟后滤去马铃薯块,将滤液补足 1000ml。 

四、保藏条件
斜面菌种和安瓿瓶冻干菌种应在 2-8°C 保存。西林瓶请放-20°C 保存。 

五、注意事项
1)冻干首次活化,干粉要全部用完不能预留,用 0.2ml 或适量的培养液或无菌术溶解,接种在 2 个斜面上,因冻干菌种处于休眠状态,请勿接种多个斜面或平板,以免因接种量不足导致复苏不成功。如有不明白之处,请务必先咨询我单位技术人员,避免不必要的损失;
2)微生物菌种应保藏于低温、清洁干燥的地方,室温放置时间过长会导致菌种衰退;
3)菌种操作应在无菌条件下进行;转种完毕,应经灭菌再做丢弃处理;
4)斜面菌种保藏时间通常为 6 个月,应根据菌种状况转接;冻干菌种保藏时间为 2-25 年;
5)菌种使用过程中如出现杂菌污染或菌种生产性能下降,应及时和中国微生物菌种查询网联系。

六、单层冻干管打管说明书
1、安瓿瓶开封:用浸过 75%酒精的脱脂棉擦净安瓿管,用火焰加热其顶端,滴少量(2-3滴)无菌水至加热顶端使之破裂,用锉刀或者镊子敲下已破裂的安瓿管顶端并将冻干管开口处在火焰上过一遍,并保持在火焰旁操作。
2、注意事项:菌种活化前,请将安瓿管保存在 4-10℃的环境下,某些菌种经过冷冻干燥并抽真空保存的,开启后必须一次使用完,不能留菌粉下次使用;另外,安瓿管里大部分是用牛奶作为保护剂,里面菌体为少数,复苏时要全部菌悬液接在新鲜培养基上,否则可能造成复苏不成功;
3、冻干菌种经过冷冻干燥保存后处于休眠状态,有时延滞期较长,如在说明书建议的培养时间还未长起来,请继续在相应的环境下多培养 24 小时或者更长时间,直至菌种培养完成;有的菌种需要连续两次继代培养才能正常生长,一般来说菌种稳定后才能用于您的后续实验。暂不启开的安瓿管应于 4℃中保藏(特殊除外)。
4、冻干管打开后需一次用完,不能留存。
5、打管操作需由专业微生物技术人员在相应的防护设备中进行,生物危害程度为三类的菌种应在生物安全柜中操作,打管时冻干管应远离面部,保护眼睛。

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