常用培养基的研制（参考）
微生物菌种查询网 / 2015-03-12 14:05:18
保藏中心细胞库建议使用背景资料上指定的培养基培养细胞系，部分常用的培养基配制方法罗列如下，培养基过滤除菌后应检测无菌状况，然后补加血清和双抗，双抗的使用浓度一般是终浓度100单位/mL培养基。当然，部分细胞可用其它培养基替代，每个实验室都有自己传统的培养基配制方法，我们提供的配制方法仅供参考。
1.消化液的配制：
①胰酶（1：250） 2.5 克
②EDTA-Na 0.3克
③NaCl 8.0克
④KCl 0.4克
⑤Glucose 1.0克
⑥Phenol Red 0.005克
⑦Water 1000 mL
磁力搅拌2-3小时，调pH 7.8-8.0，过滤除菌。
2．MEM medium (1L)
① MEM 1瓶（代）
Non-essential amino acids 10 mL
丙酮酸钠 0.11克
water 800 mL
磁力搅拌2-3小时
② NaHCO3 2.0克
water 200 mL
磁力搅拌1小时
①+②, 调pH 7.0-7.2，过滤除菌。
3. RPMI 1640 medium (1L)
① RPMI 1640 1瓶（代）
L-Glutamine 0.11克
丙酮酸钠 0.11克
water 800 mL
磁力搅拌2-3小时
② NaHCO3 2.0克
water 200 mL
磁力搅拌1小时
①+②, 调pH 7.0-7.2，过滤除菌。
4. DMEM medium (1L)
① DMEM 1瓶（代）
Glucose 3.5克
water 800 mL
磁力搅拌2-3小时
② NaHCO3 2.0克
water 200 mL
磁力搅拌1小时
①+②, 调pH 7.0-7.2，过滤除菌。
5. Grace`s Medium
Grace`s Insect Cell Culture Medium 1瓶（代）
Yeast extract 3.3克
Lactal albumen hydrolysate 3.3克
NaHCO3 0.35克
water 1000 mL
在15-30℃磁力搅拌4-5小时
用2N KOH 调pH至6.5-6.6，过滤除菌。
6．DMEM/F12 Medium
① DMEM/F12 1瓶（代）
L-Glutamine 0.2克
丙酮酸钠 0.11克
water 800 mL
磁力搅拌2-3小时
② NaHCO3 2.0克
water 200 mL
磁力搅拌1小时
①+②, 调pH 7.0-7.2，过滤除菌。
7. 部分常用的微生物检测培养基
7.1 Sabouraud dexrosebroth (Difco 0382-01) SDB
Sabouraud powder 3.00g
Distilled water 100ml pH 5.6
Dispense 3ml aliquots of broth into each of 33 test tubes (12×100mm), and cap each tube loosely.
7.2 Brain heart infusion broth BHI (Difco 0037-01-6)
Broain heart infusion powder 3.70g
Distilled water 100ml pH 7.4
Dispense 33 test tubes (12×100mm), and cap each tube loosely.
7.3 Thioglycollate medium THIO (Difco 0256-01)
Thioglycollate powder 2.98g
Distilled water 100ml pH 7.1
Dispense 33 test tubes (12×100mm), and cap each tube loosely.
7.4 Trypticase soy broth TSB (BBL 01-162)
Trypticase soy broth powder 3.00 g
Distilled water 100ml pH 7.3
Dispense 33 test tubes (12×100mm), and cap each tube loosely.
All medium are sterilized in an autoclave for 20 min at 15 lbc pressure (121℃) on slow exhaust. Store at room temperature or 4℃
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