
一、背景
MMO-MUG培养基主要用于生活饮用水及其水源水中大肠菌群和大肠埃希氏菌的同时检测。目前我国对生活饮用水、水源水、地表水等进行卫生学评价,检测的指标为大肠菌群和大肠埃希氏菌或粪大肠菌群(耐热大肠菌群),以这些指标作为粪便污染的指示菌。固定底物技术酶底物法是比较快速简便的检测方法,该方法使用的培养基为MMO-MUG培养基。
二、原理
固定底物技术酶底物法采用大肠菌群细菌能产生β-半乳糖苷酶(β-D-galactosidase)分解ONPG使培养液呈黄色,以及大肠埃希氏菌产生β-葡萄糖醛酸酶(β-glucuronidase)分解MUG使培养液在波长366nm紫外光下产生荧光的原理,来判断水样中是否含有大肠菌群及大肠埃希氏菌。
三、方法步骤
1、定性试验:用100ml的无菌稀释瓶量取100ml水样,加入本品2.7±0.5克,混摇均匀使其完全溶解,放入36±1℃培养箱内培养24h。
2、10管法。
3、51孔定量盘法。
四、结果
若水样颜色变成黄色,则表示该水样含有总大肠菌群。若培养液在波长366nm紫外光下产生荧光,则表示该水样含有大肠埃希氏菌。
五、应用
用于水中大肠菌群和大肠埃希氏菌检测方法的比较:
比较多管发酵法(包括乳糖蛋白胨和EC-MUG培养基)与酶底物法(MMO-MUG培养基)测定水中大肠菌群和大肠埃希氏菌,为日常水质检测大肠菌群和大肠埃希氏菌选用一种最佳检测方法。方法依照《生活饮用水标准检验方法》GB5750-2006中的多管发酵法与酶底物法测定水中大肠菌群和大肠埃希氏菌,进行方法的适用性试验、灵敏度试验、水样加标试验及实际水样品检测应用。
结果适用性试验结果为多管发酵法与酶底物法检测结果显示有某些菌株的差别;灵敏度试验酶底物法约为1 cfu/100 mL,多管发酵法约为1 cfu/100m;加标试验结果三种培养基法无明显差别;水样品检测两种方法的结果差别无显著性。结论多管发酵法与酶底物法检测水中大肠菌群和大肠埃希氏菌的结果差别无显著性,但酶底物法只需一种培养基在24h内同时检出大肠菌群和大肠埃希氏菌结果,操作更为方便、时间可节约24 h~48 h、结果观察直观容易。
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