ST(猪睾丸细胞)的冻存与复苏方法!
小杨 / 2020-04-24 09:03:04


一、细胞简介
平台编号:bio-73160
拉丁属名:ST
细胞名称:ST(猪睾丸细胞) 
种属:猪 
年龄:(性别) 80-90日龄 
生长特性:贴壁,在软琼脂中成簇生长,并可悬浮生长
细胞形态:成纤维细胞样 
细胞传代:1:3 传代
细胞活力:90%(Viability by Trypan Blue Exclusion)
细胞检测:细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌
细胞冻存:液氮冻存(基础培养基+10%DMSO+20%FBS)
细胞运输:干冰运输(1 Vial)或活细胞运输(T-25 flasks)
细胞用途:人乳腺管癌细胞价格只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗
背景描述:ST细胞是由Mcclurkin·A· W等人于1960年建系。ST细胞一般用于病毒增殖和分离,是猪细小病毒的理想宿主;ST细胞可用于这类病毒的分离及增殖。 
生长培养基:MEM(货号:PM150410)+10% FBS(货号:164210-500)+1% P/S(货号:PB180120) 
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5% 温度:37℃
说明书下载:ST.pdf

二、ST(猪睾丸细胞)的冻存方法
1、细胞:选对数生长期细胞,收集细胞24小时前换液一次。
2、计数:按常规方法把细胞制成细胞悬液,计数,令细胞密度达5×106/ml,离心去上清,吸入离心管中。
3、冻存液:先用培养液9分+DMSO 1分(或甘油)配成10%的DMSO冻存液,按上法一滴滴加入离心管中,然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。
4、分装:分装入无菌安剖中,每安剖加1.5毫升细胞悬液。
5、封口:用塑料安剖时拧紧瓶口即可;如用火焰封闭安剖口后,仔细检查,定要封严,必要时可浸入蓝色液中观察,为安全起见,把安剖缝入纱布小袋中,以防液氮浸入后,融解时因受热发生爆炸伤人;纱袋一端系以线绳,末端扎有小牌,注明:细胞名称,冻存日期,以便日后查找。

三、ST(猪睾丸细胞)的复苏方法
1、从液氮罐中取出安剖;有时因安剖未封严,浸入了液氮,取出后因安剖内液氮迅速气化而发生爆炸,因此应带有防护眼睛和手套。
2、迅速放入盛有36℃~37℃水的搪瓷罐中,扣上盖并不时摇动,尽快解冻。
3、剪开纱布口袋,取出安剖,用70%酒精擦拭消毒后,净化台上打开盖,用吸管吸出细胞悬液,装入离心管中,再补加10ml培养液,吹打使细胞悬浮。
4、低速离心(500~1000转/分)5分钟,取上清后再重复用培养液漂洗、离心。
5、加入培养液适当稀释后,再移装入培养瓶中,置温箱培养,次日更换一次培养液后再继续培养。

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