一、产品简介
平台编号：bio-74173
产品规格：25cm2 培养瓶
拉丁属名：原代细胞取组织现分
中文名称：鸡卵泡颗粒细胞
英文名称：Chicken follicular granulosa cells
组织来源：鸡卵泡
培养基信息：1）基本培养基：M199
2）添加因子：5%FBS、Penicillin、Streptomycin 等。
细胞简介：
鸡卵泡颗粒细胞分离自 PMSG 诱导后 3 天的鸡卵巢组织，颗粒细胞是卵巢的主要功能细胞，其增殖与分化直接影响着卵泡的生长启动、发育、排卵、黄体形成以及甾体激素分泌等卵巢功能活动。细胞形状呈圆形或椭圆形。本公司生产的鸡卵泡颗粒细胞采用机械分离法制备而来，细胞总量约为 5×105 个/瓶，细胞纯度可达 80%以上，且不含有 HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
二、生理结构
鸡卵泡颗粒细胞分离自鸡卵泡组织；成熟卵泡是卵巢的组织结构成分之一，卵泡腔很大，卵丘很明显。卵泡内膜细胞紧靠卵泡颗粒层，与颗粒层细胞之间有一层基膜相隔，内膜细胞呈多边形，胞质清亮，胞核圆形，细胞间可见许多毛细血管，外膜细胞Chemicalbook位于最外层，多呈梭形，与周围结缔组织分界不明显。卵泡(follicle)中卵母细胞四周有一层菱形或扁平细胞围绕，在卵泡开始发育、卵细胞成长的同时，周围的菱形细胞变为立方形，并由单层增生成复层，因其细胞浆内含有颗粒，故称为颗粒细胞。
三、细胞形状
初级卵泡的颗粒细胞为单层；次级卵泡的颗粒细胞增至复层；成熟卵泡的颗粒细胞展开又变为单层。颗粒细胞的胞核大而圆，着色深，细胞的游离面有许多细长突起伸入放射带的凹陷部。
四、使用方法
客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作。(该细胞传代次数有限约 2 代，建议客户收到细胞后尽快安排后续实验)
1、取出细胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培养箱中静置 6-8 小时，以稳定细胞状态。
2、待细胞达到 80%汇合时准备进行传代培养。
3、细胞传代：
1)吸出细胞瓶中的培养基，用 PBS 清洗细胞一次。
2)加入 0.125%胰蛋白酶消化液约 1mL 至培养瓶中，37℃消化 3min 左右；显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化。
3)用吸管轻轻吹打混匀，按 1:2 或 1:3 等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 细胞培养箱中培养。
4)待细胞完全贴壁后，培养观察，每隔 2-3 天更换新鲜的完全培养基。
五、注意事项
1、培养基于 4℃条件下可保存 3-6 个月。
2、在细胞培养过程中，请注意保持无菌操作。
3、传代培养过程中，胰酶消化时间不宜过长，否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4、该细胞只可用于科研。
备注：由于实验所用试剂与操作环境的不同，以上方法供各实验室参考。
六、产品的运输和保存
视天气状况和运输距离远近，公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中，置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输；收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养，如无法立刻进行复苏操作，冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满完全培养基后进行常温运输；收到细胞后请镜下观察细胞生长状态，如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作，如悬浮的细胞较多，请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
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