一、细胞简介
平台编号:bio-73061
规格:5×10?cells/T25培养瓶
拉丁属名:HuH-7
细胞名称:HuH-7(人肝癌细胞)
种属:人
年龄(性别):男
生长特性:贴壁
细胞形态:上皮细胞样
基本特性:细胞生长:贴壁生长
背景描述:据说,HuH-7细胞可产甲胎蛋白、胰酶α抗体、血浆铜蓝蛋白、纤维蛋白原、纤维粘连蛋白等。
生长培养基:DMEM高糖(货号:PM150210)+10% FBS(货号:164210-500)+1% P/S(货号:PB180120)
培养条件;气相:空气,95%;CO2,5% 温度:37℃
细胞生长:贴壁生长
细胞形态:上皮样
细胞数量:1×106个细胞数
细胞传代:1:2传代消化3-5分钟3天内可长满
细胞特性:据说产甲胎蛋白胰酶α抗体血浆铜蓝蛋白纤维蛋白原纤维粘连蛋白等
细胞纯度:92%
细胞活力:89%(ViabilitybyTrypanBlueExclusion)
说明书下载:HuH-7.pdf
二、HuH-7(人肝癌细胞)分化的特点
1、持久性:细胞分化贯穿于生物体整个生命进程中,在胚胎期达到*程度
2、稳定性和不可逆性:一般来说,分化了的细胞将一直保持分化后的状态,直到死亡
3、普遍性:生物界普遍存在,是生物个体发育的基础
三、HuH-7(人肝癌细胞)的特性
经测试,本产品具有良好的增殖和分化潜能,可分化为成骨细胞、脂肪细胞、软骨细胞等。流式检测结果显示,CD29、CD44、CD105阳性,CD34、CD45阴性。
四、HuH-7(人肝癌细胞)的培养方法
贴壁细胞
1、用75%酒精喷洒整个瓶消毒,将其平躺置于培养箱中进行2-3小时的缓冲,.然后置于无菌操作台,打开瓶口,将其中的培养液去掉,再往其中加入5-6mL新鲜培养基并置于细胞培养箱中培养,根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液以及传代;
2、待细胞长满瓶底面积80%-90%,需要对其进行传代,di一次传代比例为1:2。
3、传代步骤:将0.25%含EDTA胰酶置于37°预热,倒掉培养瓶中的培养基,往培养瓶中加入1mlPBS,轻晃洗涤后弃去。往瓶中加1ml预热好的胰酶,置于37°孵育消化(di一次消化需时常取出置于显微镜下观察,以显微镜下细胞触角回收变圆、轻拍瓶壁见细胞脱落为zui佳消化时间,记录zui佳消化时间,以便于下次消化),消化好后加入1ml完全培养基终止消化。用移液枪轻轻吹打瓶壁上的细胞,使之完全脱落,然后收集细胞悬液,1200rpm离心3min,弃上清,加入完全培养基重悬细胞,进行传代。
五、HuH-7(人肝癌细胞)的运输保存
采用干冰保存运输。收到细胞时,若干冰已经完全融化,请立即将细胞复苏培养;若尚留有干冰,请立即将细胞放入液氮中保存待用,请按指定条件贮存细胞,切不可将细胞置于高温环境。
六、HuH-7(人肝癌细胞)的冷冻保存方法
1、冷冻管置于4℃300分钟→(-20℃30分钟*)→-80℃16~18小时(或隔夜)→液氮槽长期储存。
2、冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期储存。-20℃不可超过1小时,以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,也可跳过此步骤直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
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