扩展青霉（测序正确）的培养及保藏方法！
小杨 / 2019-12-23 09:04:45
扩展青霉的菌落小斑点状，草绿色；背面肉桂色，中央有红色的小点。分生孢子梗顶端1-2次帚状分枝，瓶状小梗细长。分生孢子扁圆形或圆形，集聚时呈青绿色，分生孢子很小，大小为1.8-2.2×1.8-2.2μm。
基本信息
平台编号：bio-25700
规格：冻干物
拉丁属名：Penicillium expansum Link
中文名：扩展青霉（测序正确）
详情介绍
中文名称：青霉菌
拉丁属名：Penicillium
种名加词：expansum Link
收藏时间*：2007-7-16
来源历史：山东果树所转
原产国：中国
资源归类编码：15151913115
模式菌株：非模式菌株
主要用途：研究；教学
特征特性：菌落在查氏酵母膏琼脂(CYA)上生长较快，25℃7天直径35-45mm，较厚，平坦；质地绒状兼有孢梗束而成颗粒状；分生孢子结构大量，灰黄绿色，近于暗硃砂绿色(Dark Cinnabar Green, Ridgway Pl. XIX)或镍绿色(Nickel Green, Ridgway Pl. XXXIII)；菌丝白色；渗出液较多，无色至橙褐色；可溶性色素无至较多，褐色；反面黄褐色至棕色。分生孢子梗发生于基质菌丝和孢梗束，孢梗茎120-500×3.0-4.0цm，壁平滑；帚状枝三轮生，偶有双轮生，彼此较紧密
具体用途：化学农药、生物农药筛选；抗病植物材料筛选；抗病基因、致病基因发掘。
生物危害程度：四类
寄主中文名称：桃
寄主拉丁名称：
致病对象：植物
致病名称：桃青霉病菌
分离基物：桃幼成熟果实
采集地区：山东泰安
采集具体地点：丘陵地果园
培养基信息：培养基编号：14 培养基名称：PDA
培养温度：26
资源保护类型：培养物
保藏方法：定期移植法
共享方式：资源交换性共享
提供形式：斜面培养物
实物状态：有实物
培养及打管说明：
1、扩展青霉安瓿瓶开封：用浸过75％酒精的脱脂棉擦净安瓿管，用火焰加热其顶端，滴少量无菌水至加热顶端使之破裂，用锉刀或者镊子敲下已破裂的安瓿管顶端。
2、菌株恢复培养：用无菌吸管吸取0.3--0.5ml适宜的液体培养基，滴入安瓿管内，轻轻振荡，使冻干菌体溶解呈悬浮状。吸取全部菌体悬浮液，移植于1-2支建议的培养基试管中，并在建议的条件下培养。
3、注意事项：菌种活化前，请将安瓿管保存在6-10℃的环境下，某些菌种经过冷冻干燥保存后，延迟期较长，需要连续两次继代培养才能正常生长
4、复苏后的菌种在传1-2代后使用。
5、暂不启开的安瓿及复苏后需保藏的斜面应于4℃中保藏。
菌种的培养：
1、扩展青霉菌种是指食用菌菌丝体及其生长基质组成的繁殖材料。菌种分为母种（一级种）、原种（二级种）和栽培种（三级种）三级。工业发酵的有用菌种，其筛选步骤包括菌种分离、初筛和复筛。
2、挑选具有某种能力的有用菌种，也称种子制备，是指菌种在一定条件下，经过扩大培养成为具有一定数量和质量的纯生产菌种的制备过程。以作接入发酵罐中进一步扩大菌体量及合成产物之用。
3、种子制备包括孢子制备和菌丝体制备 菌种制备。
4、保存在沙土管或冷冻管中的生产菌种，用无菌手续挑取少许，接入琼脂斜面培养基上，在25℃（或较高温度）下培养5～7天（或较长时间。所得孢子还需进一步用较大表面积的固体培养基以获得更多孢子（对于霉菌类孢子制备，多数采用大米、小米之类的天然培养基）。
5、将培养成熟的斜面孢子制成悬浮液，接种到扁瓶固体培养基上，于25～28℃培养14天。将成熟的扁瓶孢子于真空中抽干，使水分降至10%以下，并放入 4℃冰箱中备用。一次制得的孢子瓶可在生产上延续使用半年左右。
6、如果有些生产菌种不产孢子，如赤霉素产生菌或产孢子不多的，则可采用摇瓶液体培养制得菌丝体，作种子罐的种子。种子罐的目的是使接入有限的孢子或菌丝体迅速发芽、生长、繁殖成大量菌体。其中的培养基组分应是易于被菌体利用的碳源（如葡萄糖）和氮源（如玉米浆），及无机盐(如磷酸盐)等。作为发酵罐的种子应生命力旺盛、染色深、菌丝粗壮，无杂菌及异常菌体。接种量一般在10%～20%。
扩展青霉保藏方法
1、传代培养保藏法
又有斜面培养、穿刺培养、疱肉培养基培养等（后者作保藏厌氧细菌用），培养后于4-6℃冰箱内保存。
2、液体石蜡覆盖保藏法
是传代培养的变相方法，能够适当延长保藏时间，它是在斜面培养物和穿刺培养物上面覆盖灭菌的液体石蜡，一方面可防止因培养基水分蒸发而引起菌种死亡，另一方面可阻止氧气进入，以减弱代谢作用。
3、载体保藏法
是将微生物吸附在适当的载体，如土壤、沙子、硅胶、滤纸上，而后进行干燥的保藏法，例如沙土保藏法和滤纸保藏法应用相当广泛。
4、寄主保藏法
用于目前尚不能在人工培养基上生长的微生物，如病毒、立克次氏体、螺旋体等，它们必须在生活的动物、昆虫、鸡胚内感染并传代，此法相当于一般微生物的传代培养保藏法。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法与冷冻干燥保藏法进行保藏。
5、冷冻保藏法
可分低温冰箱（-20-30℃，-50-80℃）、干冰酒精快速冻结（约-70℃）和液氮（-196℃）等保藏法。