变异链球菌 BIOBW生物自主菌种保藏
小杨 / 2019-12-02 09:48:25
变异链球菌（streptococcus mutans，简称变链菌）是一种生长于口腔的细菌，具有分泌酸性物质腐蚀牙釉质的特点，为人类主要致龋齿菌之一，在口腔医学领域被广泛研究。
基本信息
平台编号：bio-53025
规格：0
拉丁属名：Streptococcus mutans
中文名：变异链球菌
其它编号：ATCC25175=NCTC10449
培养基编号：114
培养温度：37
用途：模式菌株，培养基测试。
保藏条件：斜面菌种和冻干菌种应在 2-8°C 保存。西林瓶请置于-20℃保存。
简单介绍
变异链球菌是早在1924年Clarke已经报告过变异链球菌是龋齿的病原菌。这种菌在普通培养基中呈球形，而在葡萄糖培养基中菌体变长，所以叫作变异链球菌。但当时普遍认为嗜酸杆菌等是龋齿最主要的病原菌，而变异链球菌并未得到重视。乃至40年后才又重新发现变异链球菌是引起龋齿最主要的细菌。变异链球菌与龋齿的关系主要是：①能在牙面上形成水不溶性的多糖类，牢固地黏着在牙面上；②在同样pH条件下，变异链球菌比血链球菌和乳酸杆菌等能溶出更多的钙；③变异链球菌能使蔗糖变为葡聚糖，并使葡萄糖几乎全部变为乳酸。变异链球菌是龋齿最主要的病原菌，但不是唯一的，其他产酸菌也能参与龋齿的发生。冠部龋除变异链球菌外，乳酸杆菌也有一定作用；根部龋除变异链球菌外，黏性放线菌(Actinomyces visco-sus)最被重视。
相关研究
通过变异链球菌临床分离株耐酸因子F-AT—Pase亚基B结构基因uncD的遗传多态性和mRNA表达水平差异，探讨其与细菌耐酸力的关系。
方法实验株包括18株高耐酸和20株低耐酸变链菌临床株，以特异引物从细菌组DNA扩增uncD，行限制性内切酶长度多态性分析（RFLP）和测序比较；应用半定量RT-PCR两步法和凝胶成像系统定量软件，对20株不同基因型和不同耐酸力变链菌uncD基因的mRNA表达水平进行评价和比较。结果AluI—RFLP产生A、B基因型，测序证实导致多态出现的基因变异不在uncD的功能区和催化结构域；这两种基因型在不同耐酸力菌株的分布不同（P〈0．05），高耐酸性菌株中A型基因uncD的检出高于低耐酸力菌株。不同耐酸力菌株uncD的mRNA表达水平不同（P〈0．05），但A、B两基因型菌株uncD的mRNA表达差异没有统计学意义（P〉0．05）。结论F-ATPase的β亚基基因具有明显的遗传多态性，基因型和mRNA表达水平的多态性与菌株的耐酸力有一定的关系，虽然β亚基基因功能区高度保守，但在酸耐受适应中，仍表现为F—ATPase较活跃上调的亚基基因。
注意事项
1）冻干首次活化，干粉要全部用完，不能预留，用 0.1-0.2ml 的培养液或无菌水溶解，接种在 1-2 支平板上，因冻干粉处于休眠状态，请勿接种多支斜面或平板，以避免因接种量不足而导致复苏不成功；如有不明白之处，请务必先咨询我单位技术人员，避免不必要的损失；
2）微生物菌种应保藏于低温、清洁干燥的地方，室温放置时间过长会导致菌种衰退；
3）菌种操作应在无菌条件下进行；转种完毕，应经灭菌再做丢弃处理；
4）应根据菌种状况及时转接，冻干菌种保藏时间通常为 2-25 年；
5）菌种使用过程中如出现杂菌污染或菌种生产性能下降，应及时和中国微生物菌种查询网联系。
单层冻干管打管说明书
1、安瓿瓶开封：用浸过 75％酒精的脱脂棉擦净安瓿管，用火焰加热其顶端，滴少量（2-3滴）无菌水至加热顶端使之破裂，用锉刀或者镊子敲下已破裂的安瓿管顶端并将冻干管开口处在火焰上过一遍，并保持在火焰旁操作。
2、注意事项：菌种活化前，请将安瓿管保存在 4-10℃的环境下，某些菌种经过冷冻干燥并抽真空保存的，开启后必须一次使用完，不能留菌粉下次使用；另外，安瓿管里大部分是用牛奶作为保护剂，里面菌体为少数，复苏时要全部菌悬液接在新鲜培养基上，否则可能造成复苏不成功；
3、冻干菌种经过冷冻干燥保存后处于休眠状态，有时延滞期较长，如在说明书建议的培养时间还未长起来，请继续在相应的环境下多培养 24 小时或者更长时间，直至菌种培养完成；有的菌种需要连续两次继代培养才能正常生长，一般来说菌种稳定后才能用于您的后续实验。
4、暂不启开的安瓿管应于 4℃中保藏（特殊除外）。
5、冻干管打开后需一次用完，不能留存。
6、打管操作需由专业微生物技术人员在相应的防护设备中进行，生物危害程度为三类的菌种应在生物安全柜中操作，打管时冻干管应远离面部，保护眼睛。
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