布鲁氏菌AMOS-PCR多重PCR检测、鉴定和分型方法!
小杨 / 2019-10-26 08:44:55


布鲁氏菌AMOS-PCR多重PCR检测鉴定方法是根据布鲁氏菌不同种插入序列IS711位置的不同而设计引物。利用AMOS-PCR方法,在不同种的布鲁氏杆菌中能够得出不同的扩增片段,通过扩增条带的大小来鉴别布鲁氏菌种。AMOS-PCR方法有较强的应用价值,可作为快速检测鉴定布鲁氏菌的方法之一。

1994年,Bricker和Halling将多重PCR方法应用于布鲁氏菌的检测鉴定研究,建立了AMOS-PCR (Abortus Melitensis Ovis Suis第一个字母的缩写)检测鉴定分型方法。

AMOS-PCR是根据布鲁氏菌不同种插入序列IS711位置的不同而设计引物,其他不同的引物分别位于插入序列邻近的染色体DNA上。即设计一个共用引物锚定于插入序列IS711上,再以羊布鲁氏菌生物1、2和3型特有序列设计引物BM,以猪布鲁氏菌生物1型特有序列设计引物BS,以牛布鲁氏菌生物1、2和4型特有序列设计引物BA,以绵羊附睾种布鲁氏菌特有序列设计引物BO。

AMOS-PCR多重PCR鉴定布鲁氏菌的引物


通过AMOS-PCR设计的5条引物,在不同种的布鲁氏杆菌中能够得出不同的扩增片段,代表种的特异性,通过扩增条带的大小来鉴别布鲁氏菌种。应用该方法可在短时间内鉴定牛种布鲁氏菌(1、2、3型),羊种布鲁氏菌(1、2、3型),猪种布鲁氏菌(1型)以及绵羊附睾种布鲁氏菌。有大量研究利用AMOS-PCR对不同布鲁氏菌分离株进行了检测鉴定,检测结果与表型鉴定的吻合度非常高,且对部分表型鉴定的非典型菌株也可以做出鉴定。AMOS-PCR方法有较强的应用价值,可作为快速鉴定布鲁氏菌的方法之一。

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