ATCC原代细胞被金葡菌污染后的补救方法！
小杨 / 2019-09-07 08:36:19
<ATCC原代细胞>
实验室常见的细胞污染通常是细菌以金黄色葡萄球菌和大肠杆菌多见，以及霉菌，黑蛟虫，支原体和真菌。其中真菌最难发现污染，也最难处理，而霉菌和支原体等不是双抗能解决的。
小编曾经遇到贴壁细胞污染，经病原微生物的老师鉴定是金葡菌污染所致，处理方法和楼主大同小异，但相对简便，最后把从ATCC购买的原代细胞救过来了。
小编简单把自己的操作步骤整理下，分享给大家：
1.倒掉培养液，用火烤瓶口和瓶盖大约1分钟
2.用大量的PBS反复冲洗，每次约30ML，重复5次
注意：在用火烤瓶口和瓶盖（如果是一次性培养瓶 时间不能太长，以免软化变性）
3.加入5ML双抗，37度，5分钟
注意：PBS冲洗两次
4.加入双抗2ML，室温5分钟
注意：PBS冲洗两次
5.加入培养液10ml 双抗2ML 6小时后换液
6.重新加入培养液双抗浓度随污染情况调整，连续5-7天
7.对于培养箱需要彻底全面消毒
8.碘伏消毒作用10分后酒精消毒10分钟，重复两次
9.紫外照射一小时
污染的细胞因为是原代，根本没有冻存，上述方法处理后传到第3代，在后来的激光共聚焦显微镜检测没有见到细胞形态异常。
细胞污染除了自己注意外，还要严防实验室的'新手'，无菌观念不能马虎啊！
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